預(yù)約儀器:提前幾天預(yù)約BECKMANCOVLTER Anvanti JXN-30儀器,,以確保實(shí)驗(yàn)?zāi)軌蝽樌M(jìn)行,,預(yù)約成功后,,采取下一步操作。
準(zhǔn)備:確認(rèn)需要清洗的離心桶,、離心桶蓋完好無損
清洗:BECKMANCOVLTER Anvanti JXN-30轉(zhuǎn)頭型號(hào)JLA-16-250對(duì)應(yīng)的規(guī)格為250ml的低速離心桶,,準(zhǔn)備4個(gè)。離心桶及桶蓋使用去去污劑刷洗干凈以去除雜蛋白,,后使用去離子水沖洗干凈,。吸取水檢測(cè)蛋白濃度,是否符合要求,,以及檢測(cè)其中的去污劑是否去除干凈,,可省略)。
高壓:將離心桶用牛皮紙包好,,貼上高壓鍋滅菌(還未查看是否能支持高壓滅菌)
注意:防止離心桶緊貼高壓鍋,,防止損壞。
化凍:將500ml的118,、124放于25℃水浴鍋中化凍,。
開機(jī):趁化凍期間刷卡接通電源,再打開離心機(jī)右側(cè)電源開關(guān),。
放轉(zhuǎn)子:確認(rèn)JLA-16-250轉(zhuǎn)子對(duì)準(zhǔn)底座后放入
調(diào)程序:點(diǎn)擊轉(zhuǎn)子對(duì)應(yīng)的JLA-16-250所對(duì)應(yīng)的型號(hào),,選擇轉(zhuǎn)速5000rpm,時(shí)間10min,4℃,。
注意:不要超過離心機(jī)所對(duì)應(yīng)的離心轉(zhuǎn)速范圍,。
預(yù)冷:蓋上離心機(jī)蓋子,然后用雙手按下離心機(jī)門,,進(jìn)行預(yù)冷,。
配平:將要離心的樣品用天平配平,誤差不大于0.1g,,配平過程中要包括離心桶的蓋子,,密封圈,裝液量要超過離心桶的80%以上,。
開蓋:打開離心蓋子時(shí),,使用腳踩住開門連鎖裝置,并且雙手輕拂蓋子,,防止蓋子被彈開,。
離心:離心開始時(shí),注意蓋好蓋子,,包括離心機(jī)的內(nèi)腔蓋子和離心機(jī)主蓋子,,再次確認(rèn)所使用的離心機(jī)轉(zhuǎn)子型號(hào)和所選參數(shù),點(diǎn)擊開始鍵開始離心,。
注意:離心速度未達(dá)到設(shè)定轉(zhuǎn)速時(shí),,不能離開離心機(jī),如果出現(xiàn)警報(bào)或者異響,,應(yīng)立即停止,,并聯(lián)系管理人員。
關(guān)機(jī):離心結(jié)束后,,先關(guān)閉離心機(jī)右側(cè)電源后刷卡下機(jī),。
歸位:使用完的物品清洗干凈后,放回原位,,并做好登記,。
取上清:準(zhǔn)備一個(gè)干凈的500ml瓶子,將上清倒入500ml瓶中,,并標(biāo)記好名稱,、日期,離心后產(chǎn)物,,存貯方式,。
收集沉淀,將離心桶中的細(xì)胞沉淀收集到合適的EP管中,,標(biāo)記名稱,、日期、離心后產(chǎn)物。