數(shù)字PCR是一種核酸檢測和定量的新方法,。同傳統(tǒng)PCR以及qPCR相比,，增加了一步分液的操作,，將幾十微升的已經(jīng)配好的包含有引物,、模板,、buffer,、酶等組分的PCR反應(yīng)體系分隔成了眾多微小的、獨(dú)立的反應(yīng)體系,，這樣能夠直接數(shù)出DNA分子的個數(shù),，對起始樣品定量，通過將一個樣本分成幾萬到幾百萬份,，分配到不同的反應(yīng)單元,，每個單元包含一個或多個拷貝的目標(biāo)分子( DNA 模板) ，在每個反應(yīng)單元中分別對目標(biāo)分子進(jìn)行PCR擴(kuò)增,，擴(kuò)增結(jié)束后對各個反應(yīng)單元的熒光信號進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,。如下圖：
 

　　PCR 運(yùn)行可以分為三個階段：
 

　　指數(shù)期
 

　　每個循環(huán)積聚的產(chǎn)物準(zhǔn)確加倍(假定 100% 反應(yīng)效率)。該反應(yīng)具有高度特異性和準(zhǔn)確度,。出現(xiàn)指數(shù)式擴(kuò)增,，因?yàn)樗性噭┚迈r可用，反應(yīng)的動力學(xué)推動反應(yīng)有利于擴(kuò)增子加倍,。
 

　　線性期(高變異性)
 

　　隨著反應(yīng)繼續(xù),，一些試劑因擴(kuò)增而被消耗。反應(yīng)開始減緩,，并且每個循環(huán)的 PCR 產(chǎn)物不再加倍,。
 

　　平臺期(終點(diǎn)：使用傳統(tǒng)方法進(jìn)行凝膠檢測)
 

　　反應(yīng)停止，不再產(chǎn)生更多產(chǎn)物,，并且如果放置時間夠長,，PCR 產(chǎn)物將開始降解。因?yàn)槊總€樣品具有不同的反應(yīng)動力學(xué)，所以每支試管或每個反應(yīng)將在不同的時間點(diǎn)進(jìn)入平臺期,。在平臺期可以看到這些差異,。在平臺期內(nèi)，傳統(tǒng) PCR 進(jìn)行測量,，又稱為終點(diǎn)檢測,。
 

　　數(shù)字PCR檢測的是游離DNA，采血管為游離DNA管,，采樣5-10ml,。檢測過程包括核酸提取、芯片制備,、PCR擴(kuò)增,、芯片閱讀、結(jié)果分析,，實(shí)現(xiàn)全程基本自動化,、封閉式操作，避免污染,。無需培養(yǎng),，節(jié)省時間；高靈敏度,，提高檢出率,；多色熒光檢測，一管血可檢測23個靶標(biāo),，節(jié)省寶貴樣本,，幫助解決“檢出率低”和“檢測周期長”兩大痛點(diǎn)，達(dá)到早期診斷,、療效監(jiān)測的目的,。