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磁珠法自動核酸提取儀又分為磁棒法和抽吸法

閱讀:2030        發(fā)布時間:2021-8-16

磁珠法自動核酸提取儀又分為磁棒法和抽吸法

 

先說抽吸法:顧名思義,,抽吸法就是通過自動移液裝置來進(jìn)行,,通過自動移液裝置來加入裂解液,、磁珠吸附;抽走裂解液,,加入漂洗液,,磁珠吸附,,抽走漂洗液,,加入洗脫緩沖液,。從步驟上好像沒什么問題,但是抽吸法大的問題在于,,為了在去除廢液的時候不抽走磁珠,,移液器不能靠磁珠太近,以防磁珠連同廢液被抽掉,這樣每一次抽廢液的時候總有一小部分不能*的抽走,,特別是磁鐵在底部的裝置,,因?yàn)榇胖楸淮盆F吸附在底部,所以移液器不能靠底部太近,,這樣漂洗液就不能*去除,,殘留的漂洗液中的鹽和乙醇會影響后面的洗脫效率和PCR成功率;磁鐵在側(cè)面的裝置殘留的液體會少些,但是洗脫的效率也不好,,依靠DNA自行溶解到洗脫緩沖液中,,除非等上半小時以上,所以有些96自動核酸提取工作站,,提取一輪的時間需要150分鐘,,32磁棒法的同樣的時間可以提5輪了。

 

再說磁棒法核酸提取儀:通量通常有8,、16,、32、96通道,,相對于抽吸法,,磁棒法的優(yōu)點(diǎn)是每一步的液體不殘留,因?yàn)榇虐糁粠ё叽胖?,轉(zhuǎn)移到下一個步驟相應(yīng)的反應(yīng)孔中,,另外選擇磁棒法的提取儀器要功能更齊全的,比如可以加熱,,每個加熱槽獨(dú)立溫控,,這樣可以設(shè)置加熱、裂解,、洗脫的不同溫度,,另外很重要的一點(diǎn)是,帶動磁棒的電機(jī)要能帶動磁棒進(jìn)行液體的快速混勻和攪拌,,這樣才有利于自動化和有助于裂解和漂洗*,。磁棒法的通量選擇是32通道,96通道的看似通量更高,,但是有個很現(xiàn)實(shí)的問題,,96個磁力棒在從一個板轉(zhuǎn)移至另外一個板的時候,磁力棒上面的液體中途滴下來怎么辦,,它會滴到別的孔中造成污染,,而32通道的磁力棒運(yùn)行軌跡不經(jīng)過其他樣本的上空,這樣不會交叉污染,。

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