細(xì)胞培養(yǎng)基的概念 01

細(xì)胞培養(yǎng)基是人工模擬細(xì)胞在體內(nèi)生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,，并提供細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),。細(xì)胞培養(yǎng)基是細(xì)胞培養(yǎng)的基礎(chǔ)，它為動(dòng)物細(xì)胞的健康快速成長(zhǎng)提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),。所以,，只要用到細(xì)胞進(jìn)行生物技術(shù)產(chǎn)品的生產(chǎn)制造，就勢(shì)必少不了細(xì)胞培養(yǎng)基,。培養(yǎng)液或培養(yǎng)基,，英文都是medium。當(dāng)它是粉劑時(shí),，傾向性地稱為培養(yǎng)基,，而將粉劑配成液體后，多稱為培養(yǎng)液,。培養(yǎng)液中常需補(bǔ)加血清,、抗生素等成分。

細(xì)胞培養(yǎng)基的分類02

培養(yǎng)基主要有：天然細(xì)胞培養(yǎng)基,、合成細(xì)胞培養(yǎng)基和無血清細(xì)胞培養(yǎng)基等,。

天然細(xì)胞培養(yǎng)基是人們?cè)缙诓捎玫募?xì)胞培養(yǎng)基,，直接取自于動(dòng)物組織提取液或體液，如血漿凝塊,、血清,、淋巴液、胚胎浸出液等,。營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高,，但成分復(fù)雜，差異大,、不穩(wěn)定,，來源也受限制。水解乳蛋白和膠原是兩種較好的天然培養(yǎng)基,，富含氨基酸,。血清是天然培養(yǎng)基中有效和常用的培養(yǎng)基，但其組成成分復(fù)雜,，其中一些成分與功能不明確,。血清的來源有胎牛血清、小?；虺膳Ｑ?、馬血清、雞血清,、羊血清及人血清,，*泛應(yīng)用的為胎牛血清和小牛血清。

合成細(xì)胞培養(yǎng)基是用化學(xué)成分明確的試劑配制的培養(yǎng)基,，組分穩(wěn)定，主要包括糖類,、必需氨基酸,、維生素、無機(jī)鹽類等,。1950年,，Morgan成功研制出具有確定化學(xué)成分的細(xì)胞培養(yǎng)液，即M199培養(yǎng)基,，可用于培養(yǎng)多種種屬來源的細(xì)胞,。1951年，Harry Eagle研發(fā)了動(dòng)物細(xì)胞體外生長(zhǎng)的人工合成培養(yǎng)基,，即必需培養(yǎng)基(MEM培養(yǎng)基),，是目前使用*泛的合成細(xì)胞培養(yǎng)基之一。合成細(xì)胞培養(yǎng)基發(fā)展至今已有幾十種,，除了沿用半個(gè)世紀(jì)的基礎(chǔ)合成細(xì)胞培養(yǎng)基之外,，近年來還出現(xiàn)了營(yíng)養(yǎng)成分更加豐富的低血清細(xì)胞培養(yǎng)基。

在細(xì)胞培養(yǎng)中，需要根據(jù)細(xì)胞種類和培養(yǎng)條件的不同選擇合適的合成細(xì)胞培養(yǎng)基,。目前,，在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中常用基礎(chǔ)細(xì)胞培養(yǎng)基有BME、MEM,、DMEM,、RPMI-1640、Ham F12,、M199 等,。由于天然培養(yǎng)基的一些營(yíng)養(yǎng)成分不能被合成細(xì)胞培養(yǎng)基*代替，因此一般需在合成細(xì)胞培養(yǎng)基中添加5％～10％的胎牛血清,。胎牛血清的加入對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)非常有效,，但胎牛血清的成分復(fù)雜，這對(duì)培養(yǎng)產(chǎn)物的分離,、純化和檢測(cè)會(huì)帶來一定的不便,，為減少胎牛血清的影響，開發(fā)了營(yíng)養(yǎng)成分更加豐富的低血清細(xì)胞培養(yǎng)基,，可以將胎牛血清的使用量降低到1～3％,。

無血清細(xì)胞培養(yǎng)基（serum free medium， SFM）是指在使用中無需添加血清的細(xì)胞培養(yǎng)基,，且其組成成分不含有任何動(dòng)物組分,。按照其組分分類，還可以分為無動(dòng)物組分無血清細(xì)胞培養(yǎng)基和化學(xué)限定無血清細(xì)胞培養(yǎng)基,，前者組分中可能含有某些植物來源成分,，而后者*由化學(xué)成分明確的組分組成。

其中,，無動(dòng)物組分無血清細(xì)胞培養(yǎng)基是目前在生物制藥行業(yè)中應(yīng)用*泛的,，它提高了細(xì)胞培養(yǎng)的質(zhì)量，避免了使用血清帶來的麻煩,。目前,，已有多種無血清培養(yǎng)基上市，如雜交瘤細(xì)胞無血清培養(yǎng)基,、CHO細(xì)胞無血清培養(yǎng)基,、Vero細(xì)胞無血清培養(yǎng)基和NS0 細(xì)胞無血清培養(yǎng)基等。無血清培養(yǎng)基通常添加生長(zhǎng)附加成分,，如激素與生長(zhǎng)因子,、低分子營(yíng)養(yǎng)成分和轉(zhuǎn)鐵蛋白等促細(xì)胞生長(zhǎng)的附加成分，一般包括胰島素,、孕酮,、腐胺,、轉(zhuǎn)鐵蛋白等。

細(xì)胞培養(yǎng)基的基本成分03

細(xì)胞培養(yǎng)基的主要成分是氨基酸,、維生素,、碳水化合物、無機(jī)鹽和其它一些輔助物質(zhì),。人工合成培養(yǎng)基使用時(shí)還需添加一定量的血清使細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖,。

氨基酸：組成蛋白質(zhì)的基本單位。不同的細(xì)胞對(duì)氨基酸的需求各異,，但幾種必需氨基酸細(xì)胞自身不能合成,，必須依靠培養(yǎng)液提供，如組氨酸,、異亮氨酸,、亮氨酸、賴氨酸,、蛋氨酸,、苯丙氨酸、蘇氨酸,、色氨酸,、纈氨酸、半胱氨酸,、酪氨酸等,。其余非必需氨基酸，細(xì)胞可以自己合成,，或通過轉(zhuǎn)氨作用由其他物質(zhì)轉(zhuǎn)化而來,。絕大部分細(xì)胞對(duì)谷氨酰胺有較高的要求，因?yàn)楣劝滨０肥亲鳛槟茉醇疤荚次镔|(zhì)同時(shí)被細(xì)胞利用,，是細(xì)胞合成核酸和蛋白質(zhì)必需的氨基酸,，在缺少谷氨酰胺時(shí)，細(xì)胞生長(zhǎng)不良而死亡,，所以各種培養(yǎng)液中都含有較多的谷氨酰胺。細(xì)胞所能利用的氨基酸是L型同分異構(gòu)體,，D型氨基酸不能被利用,。

維生素：維持細(xì)胞生長(zhǎng)的一種生物活性物質(zhì)，對(duì)細(xì)胞代謝有重大作用,。它們?cè)诩?xì)胞中大多形成酶的輔基或輔酶,，沒有它們，酶便沒有活性,，代謝活動(dòng)將無法進(jìn)行,。維生素分為水溶和脂溶兩大類,，培養(yǎng)液中直接采用ATP和輔酶。

葡萄糖：大部分培養(yǎng)基都以葡萄糖作為能量來源之一,。

無機(jī)鹽：維持培養(yǎng)基滲透壓平衡,，參與細(xì)胞的代謝活動(dòng)。主要有Na+,、K+,、Ca2+、Mg2+ 等,。Na+是細(xì)胞外液中最主要的陽離子,，對(duì)維持滲透壓的恒定有決定性的作用。K+主要分布在細(xì)胞內(nèi)液,，細(xì)胞內(nèi)K+對(duì)于激活某些酶是必需的,，并在調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的酸堿平衡上也有極重要意義。Ca2+在細(xì)胞外液中的作用是將組織內(nèi)部細(xì)胞之間相互粘著,，在細(xì)胞內(nèi)參與許多重要的細(xì)胞生理活動(dòng),，如傳導(dǎo)、參與肌肉細(xì)胞收縮等,。在懸浮培養(yǎng)時(shí),，為了減少細(xì)胞的聚集和附著，要減少Ca2+的濃度,。Mg2+是構(gòu)成細(xì)胞間質(zhì)的重要成分,，對(duì)于細(xì)胞間相互穩(wěn)定結(jié)合有很重要的意義。磷的化合物對(duì)細(xì)胞物質(zhì)代謝和生理功能調(diào)控有重要作用,。

其他成分：表皮生長(zhǎng)因子,、胰島素、多肽,、核苷,、嘌呤等?？蓭椭?xì)胞的克隆化培養(yǎng)及維持某些特殊細(xì)胞系的生長(zhǎng),。

上海昆盟生物科技有限公司 (Coweldgen Scientific Co.,LTD) 是一家專注于生命科學(xué)領(lǐng)域提供相關(guān)試劑產(chǎn)品和服務(wù)的生物高科技企業(yè)，坐落于上海聚科生物產(chǎn)業(yè)園,。公司提供種類齊全的細(xì)胞系,、質(zhì)量穩(wěn)定的細(xì)胞培養(yǎng)試劑產(chǎn)品、成熟高效的技術(shù)服務(wù),、專業(yè)周到的技術(shù)支持,。本著“守正創(chuàng)新，科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)"的理念,，我們以高標(biāo)準(zhǔn)塑造行業(yè)品牌,，以全新視野構(gòu)建現(xiàn)代企業(yè),，勇于探索和創(chuàng)新。公司業(yè)務(wù)范圍涉及全國(guó)各省市自治區(qū),，與國(guó)內(nèi)多家醫(yī)院,、高校、科研院所,、生物科技公司建立了良好的合作關(guān)系,，贏得了良好的市場(chǎng)聲譽(yù)和廣泛的認(rèn)可，我們保證將繼續(xù)為廣大科研用戶提供專業(yè),、高效,、優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品及服務(wù)！細(xì)胞系(帶STR鑒定) | 原代細(xì)胞 | 細(xì)胞培養(yǎng)基 | 血清 | 細(xì)胞培養(yǎng)添加因子 | 標(biāo)記細(xì)胞 | 耐藥細(xì)胞 | 生化檢測(cè)試劑盒 | WB試劑 | 抗體 等,；ATAC-seq分析 | ChIP-seq分析 | 宏基因組測(cè)序分析 | 16S rRNA測(cè)序分析 | Pull down實(shí)驗(yàn) | RIP 實(shí)驗(yàn) | ChIP實(shí)驗(yàn) | Co-IP實(shí)驗(yàn) | 質(zhì)譜檢測(cè) | WB檢測(cè) | PCR檢測(cè) | 細(xì)胞培養(yǎng)/增殖/凋亡/周期/遷移/侵襲/自噬 | 活體成像 | 免疫組化 | 電鏡檢測(cè) | micro-CT 檢測(cè) 等,。