加油新學期

謹記：對抗污染，預防大于一切,！

在細胞培養(yǎng)過程中,，很多小伙伴兒一直受到支原體污染的困擾，我自己養(yǎng)的細胞曾經也遇到過支原體污染,，深受其害呀,！針對于支原體污染來說，大家一定注意預防,！如果已經發(fā)現了一絲絲污染跡象,，就要做到早發(fā)現、早挽救,！如果細胞能夠救回來,，還是可以繼續(xù)實驗的，不耽誤實驗進度,。不過,，確實也很難*清除啊,！如果說實在救不回來,，那就再買一株新的細胞吧！最后,，要買細胞的同學和老師,，可以電話或郵箱聯系我們哦！

支原體污染對細胞培養(yǎng)造成多方面的不良影響,，已經成為在細胞培養(yǎng)時的一個嚴重問題,，嚴重干擾實驗結果的可信度。因此,，定期進行支原體檢測和去除,，確保無支原體存在細胞培養(yǎng)體系內才能獲得準確有效的實驗數據。

什么是支原體（Mycoplasma）

支原體是1898年Nocard等發(fā)現的一種類似細菌但不具有細胞壁的原核微生物,，能在無生命的人工培養(yǎng)基上生長繁殖,，直徑50-300nm，能通過細菌濾器,。過去曾稱之為類胸膜肺炎微生物（pleuropneumonia-like organism,，PPLO）。1967年正式命名為支原體,。

支原體又稱霉形體,，支原體細胞中可見的細胞器只有核糖體（支原體是原核細胞，原核細胞的細胞器只有核糖體）,。支原體是目前發(fā)現的smallest,、simplest的原核生物，可以輕松地通過濾膜，混入培養(yǎng)系統(tǒng)中,，呈高度多形性,，多數呈球形，也有桿形,、絲狀,、分支狀等多種形態(tài)。通常依附在細胞膜表面,，支原體沒有剛性的細胞壁,，因此普通的抗生素對它根本不起作用，實驗室常見的種類有：口腔支原體,、精氨酸支原體,、豬鼻支原體、發(fā)酵支原體,、人型支原體,、唾液支原體、肺支原體和梨支原體等,。

支原體污染的后果

細菌和真菌造成的污染相對比較容易檢測,、預防和去除，然而支原體造成的污染很難察覺,，即使生長密度高達 10^7-10^9 CFU/mL,，也很難有污染跡象（渾濁、pH變化等）,。支原體污染后會導致細胞生長變慢,，狀態(tài)變差，不會馬上使細胞致死,，但會影響細胞內的各種參數,，如改變細胞膜抗原性，改變細胞新陳代謝,，干擾核酸的合成,，改變 DNA 轉染效率，導致染色體畸變等,。 

支原體污染來源

1. 工作環(huán)境的污染

2. 培養(yǎng)基或其他試劑的污染

3. 污染支原體的細胞造成的交叉污染

4. 實驗器材帶來的污染

5. 操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)

6. 用來制備細胞的原始組織或器官的污染,。

1. 疑似支原體污染,，可通過檢測來確認是否污染；

2. 經檢測沒有發(fā)現支原體污染,，可采用支原體預防試劑,，在平時實驗中做好環(huán)境和實驗用具的消毒工作；

3. 經檢測確為支原體污染,，使用支原體去除試劑進行挽救,；如果救不回來的，只能重新復蘇一管或者引進新的細胞,；如果能夠挽救回來,，后續(xù)實驗中要定期采用支原體預防試劑，避免支原體的污染,。

細胞系(帶STR鑒定) | 原代細胞 | 細胞培養(yǎng)基 | 血清 | 細胞培養(yǎng)添加因子 | 標記細胞 | 耐藥細胞 | 生化檢測試劑盒 | WB試劑 | 抗體 等,；ATAC-seq分析 | ChIP-seq分析 | 宏基因組測序分析 | 16S rRNA測序分析 | Pull down實驗 | RIP 實驗 | ChIP實驗 | Co-IP實驗 | 質譜檢測 | WB檢測 | PCR檢測 | 細胞培養(yǎng)/增殖/凋亡/周期/遷移/侵襲/自噬 | 活體成像 | 免疫組化 | 電鏡檢測 | micro-CT 檢測  等,。

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