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內(nèi)毒素(Endotoxin)是革蘭氏陰性菌細胞壁上的一種脂多糖,，它能引起哺乳動物發(fā)熱,，甚至?xí)?dǎo)致動物休克,。常規(guī)的質(zhì)粒純化試劑盒由于無法去除內(nèi)毒素的污染,，從而大大降低了質(zhì)粒轉(zhuǎn)染的效率。Omega公司采用*的內(nèi)毒素吸附緩沖液(ETR Solution),，能有效去除質(zhì)粒中的內(nèi)毒素污染,，純化的質(zhì)粒中內(nèi)毒素含量小于0.1EU/µg，可大大提高轉(zhuǎn)染實驗效率和動物注射效果,。從培養(yǎng)過夜的菌液中收集細菌后,，采用經(jīng)典的堿裂解法裂解細菌，離心去除染色體DNA和蛋白質(zhì),，得到含有質(zhì)粒和內(nèi)毒素的上清液,，加入ETR Solution吸附內(nèi)毒素,得到不含內(nèi)毒素的上清液，調(diào)節(jié)結(jié)合條件并轉(zhuǎn)移至硅膠柱,，離心吸附質(zhì)粒DNA,，經(jīng)兩種溶液洗滌去除殘余蛋白質(zhì)和各種雜質(zhì)，最后用Endotoxin-free Elution Buffer洗脫出質(zhì)粒DNA,。