微滴式數(shù)字PCR儀系統(tǒng)是由兩個儀器(微滴生成儀和)及其相關(guān)的消耗品構(gòu)成,。液滴生成儀用于將PCR反應(yīng)生成20,000個納升大小的液滴,。在使用熱循環(huán)儀進(jìn)行PCR后,微滴分析儀將逐個分析每個樣品中的液滴,。微滴被吸入后,,管路將分解乳化的液滴,并使它們依次通過一個雙色光學(xué)檢測系統(tǒng),。每次運行最多可處理 96 個樣品,。系統(tǒng)將計算陽性和陰性微滴的數(shù)量,從而以數(shù)字格式對靶DNA進(jìn)行絕對定量分析,。此外,,對于經(jīng)過PCR的液滴,還可以提取擴增的產(chǎn)品以用于下游環(huán)節(jié),,例如測序或克隆,。
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微滴式數(shù)字PCR儀的應(yīng)用領(lǐng)域:
1、癌癥生物標(biāo)志研究和拷貝數(shù)變異分析:以較好的靈敏度和解析能力測量癌癥突變的變異程度,、檢測稀有的DNA靶拷貝以及解析拷貝數(shù)變異狀態(tài),。
2、病原體檢測:采用極為精確的 系統(tǒng)對靶DNA或RNA分子中的細(xì)微變化進(jìn)行定量分析,,從而檢測和監(jiān)測病原體,。
3、新一代測序:無需使用標(biāo)準(zhǔn)曲線,,直接對NGS庫執(zhí)行絕對定量分析,。
4、基因表達(dá)分析:對少量mRNA和miRNA的細(xì)微變化進(jìn)行可靠和可重復(fù)的檢測,。
5,、環(huán)境監(jiān)測:使用系統(tǒng)可測試多種環(huán)境樣品,例如土壤和水,。
6,、食品檢測:采用經(jīng)過驗證的ddPCR方法對轉(zhuǎn)基因生物體 (GMO) 進(jìn)行評估。
系統(tǒng)的優(yōu)點:
1、準(zhǔn)確,、靈敏的數(shù)字PCR解決方案,,具有廣泛的應(yīng)用;
2,、靈活的數(shù)字PCR化學(xué)方法,,已針對TaqMan水解探針和EvaGreen測定進(jìn)行優(yōu)化;
3,、靈活的測定設(shè)置,,可通過擴展實現(xiàn)高度的靈敏性或較大的通量;
4,、簡便而易用的工作流程,,通量達(dá)96個樣品;
5,、QX200 Droplet Digital技術(shù)的微滴劃分功能可減少擴增效率和PCR抑制劑的影響,;
6、便捷的測定設(shè)計,,不需要標(biāo)準(zhǔn)曲線,。
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