二氧化碳培養(yǎng)箱使用說明
二氧化碳培養(yǎng)箱是科研機構(gòu)*的重要設(shè)備,,分布于大學(xué),、醫(yī)院各個實驗室。它通過在培養(yǎng)箱箱體內(nèi)模擬形成一個類似細胞組織在生物體內(nèi)的生長環(huán)境如恒定的酸堿度(pH值:7.2—7.4),,穩(wěn)定的溫度(37℃),,較高的相對濕度(95%),穩(wěn)定的二氧化碳水平(5%)來對組織,、細胞,、細菌進行體外培養(yǎng)的一種裝置。
二氧化碳培養(yǎng)箱有兩條基本的要求:一是要求二氧化碳培養(yǎng)箱能夠?qū)囟?、二氧化碳濃度和濕度提供zui穩(wěn)定的控制,,以便于其研究工作的進展,;二是要求二氧化碳培養(yǎng)箱能夠?qū)ε囵B(yǎng)箱內(nèi)的微生物污染進行有效的防范,并能夠定期消除污染,,以保護研究成果,,防止樣品損失。
工作原理
水套式二氧化碳培養(yǎng)箱的溫度是通過電熱絲給水套內(nèi)的水加熱,,再通過箱內(nèi)溫度傳感器來檢測溫度變化,,使箱內(nèi)的溫度恒定在設(shè)置溫度。氣套式二氧化碳培養(yǎng)箱的加熱是通過遍布箱體氣套層內(nèi)的加熱器直接對內(nèi)箱體進行加熱的,,又叫六面直接加熱,。氣套式與水套式相比,具有加熱快,,溫度的恢復(fù)比水套式培養(yǎng)箱迅速的特點,,特別有利于短期培養(yǎng)以及需要箱門頻繁開關(guān)的培養(yǎng)。箱內(nèi)溫度一般設(shè)定在37℃左右,。
二氧化碳培養(yǎng)箱控制二氧化碳的濃度是通過二氧化碳濃度傳感器來進行的,。二氧化碳傳感器用來檢測箱體內(nèi)二氧化碳濃度,將檢測結(jié)果傳遞給控制電路及電磁閥等控制器件,,如果檢測到箱內(nèi)二氧化碳濃度偏低,,則電磁閥打開,二氧化碳進入箱體內(nèi),,直到二氧化碳濃度達到所設(shè)置濃度,,此時電磁閥關(guān)閉,箱內(nèi)二氧化碳切斷,,達到穩(wěn)定狀態(tài),。二氧化碳采樣器將箱內(nèi)二氧化碳和空氣混合后的氣體取樣到機器外部面板的采樣口,以隨時用二氧化碳濃度測定儀來檢測二氧化碳的濃度是否達到要求,。
目前大多數(shù)的二氧化碳培養(yǎng)箱是通過增濕盤的蒸發(fā)作用產(chǎn)生濕氣的(其產(chǎn)生的相對濕度水平可達95%左右,,但開門后濕度恢復(fù)速度很慢)。因為濕度蒸發(fā)面積越大,,越容易達到zui大相對飽和濕度并且開關(guān)門后的濕度恢復(fù)的時間越短,。所以濕度蒸發(fā)面積大的培養(yǎng)箱較濕度蒸發(fā)面積小的培養(yǎng)箱容易保持zui大相對飽和濕度。
使用前的準(zhǔn)備工作
二氧化碳培養(yǎng)箱應(yīng)由專人負(fù)責(zé)使用,,操作盤上的任何開關(guān)和調(diào)節(jié)旋扭一旦固定后,,不要隨意扭動,以免影響箱內(nèi)溫度,,二氧化碳濃度,,濕度的波動,同時降低機器的靈敏度,。箱子的放置要水平,,避免陽光直射和灰塵等,,要保證儀器周圍的氣流循環(huán),后部及側(cè)面應(yīng)留出5cm的空隙,。加裝穩(wěn)壓電源保證電源電壓波動不超過220V±10%,。所加入的水必須是蒸餾水或無離子水,防止礦物質(zhì)儲積在水箱內(nèi)產(chǎn)生腐蝕作用,,經(jīng)常檢查箱內(nèi)水是否足夠,,水位應(yīng)加至“水位指示燈”滅燈時為止。使用前箱內(nèi)應(yīng)用消毒酒精或碘溶液*擦洗,,防止其他微生物污染,,導(dǎo)致實驗失敗。在房間安裝空調(diào),,使環(huán)境溫度保持在25~C左右,。所使用的二氧化碳必須是純凈的,否則降低二氧化碳傳感器的靈敏度和污染二氧化碳過濾裝置,。
正確充氣延長二氧化碳傳感器使用壽命?。?!
二氧化碳培養(yǎng)箱箱內(nèi)氣壓由二氧化碳氣體傳感器控制,。二氧化碳傳感器正常反饋要求進氣壓為MedicalEquipmentVo1.22,No.40.06MPa,。當(dāng)箱內(nèi)氣壓降低時,,二氧化碳傳感器在低壓刺激下有節(jié)奏地開閉,向箱內(nèi)慢慢充氣,,當(dāng)進氣壓達0.1MPa時,,自動停止調(diào)節(jié)。如充氣方法不當(dāng),,使進氣壓力增大,,當(dāng)超過0.1MPa甚至0.2MPa壓力,會損傷二氧化碳傳感器,。開始這種損傷效應(yīng)不明顯,,不易察覺,反復(fù)錯誤操作,,二氧化碳傳感器損傷累積zui終致命損壞,使氣壓調(diào)節(jié)失靈,。因此,,二氧化碳傳感器壽命與二氧化碳進氣壓大小有關(guān),只要做好進氣壓調(diào)節(jié),,就能保護二氧化碳傳感器性能,。二氧化碳傳感器價格昂貴,,更換不易,所以一定要做好進氣壓調(diào)節(jié),,延長二氧化碳傳感器使用壽命,。
做培養(yǎng)時注意培養(yǎng)箱濕度
箱內(nèi)濕度對于培養(yǎng)工作來說是一項非常重要然而又經(jīng)常被忽略的因素。因為飽和濕度環(huán)境可以避免培養(yǎng)液中二氧化碳逃逸,,培養(yǎng)液中pH值穩(wěn)定,,有利于細胞生長,足夠的濕度水平并且要有足夠快的濕度恢復(fù)速度(如在開關(guān)門后)才能保證不會由于過度干燥而導(dǎo)致培養(yǎng)失敗,。所以二氧化碳培養(yǎng)箱使用過程中,,在箱內(nèi)托盤中放一定量的滅菌水(3/2至全盤),使箱內(nèi)成為飽和濕度環(huán)境,。如使用者忘記補加水,,使培養(yǎng)細胞處于低濕度甚至干熱環(huán)境中,培養(yǎng)液二氧化碳氣體易揮發(fā),,液體pH值升高,,影響細胞生長,在工作中要力求避免此問題發(fā)生,。樣本多時,,箱內(nèi)分區(qū)存放,培養(yǎng)物用筐或瓷盤存放,,這樣存取快速,,縮短開門時間,減少箱內(nèi)氣體和濕度變化,,節(jié)省氣體,,穩(wěn)定了細胞生長環(huán)境。
防止二氧化碳培養(yǎng)箱污染做好箱內(nèi)消毒
二氧化碳培養(yǎng)箱污染是導(dǎo)致細胞培養(yǎng)失敗的一個主要因素,,所以要減少和防止污染的發(fā)生,,主要途徑是盡量減少微生物可以生長的區(qū)域和表面,采取消毒措施,。例如,,針對箱內(nèi)濕熱環(huán)境易滋生細菌等問題,我們采用在1000mL水中加2mL新潔爾滅液,,定期用酒精和紫外線消毒箱內(nèi)空氣,,培養(yǎng)物酒精擦拭人箱內(nèi),盤里的水至少要一周換一次,,控制污染,,可以維持適應(yīng)的蒸發(fā)作用,減少箱內(nèi)微生物滋生速度,。為了培養(yǎng)箱免受污染并且保證儀器箱體內(nèi)的生物清潔性,,有些二氧化碳培養(yǎng)箱設(shè)計了自動排除污染裝置來有效防止污染的產(chǎn)生,。目前有多種消毒滅菌方式,如帶有紫外消毒功能的CO2培養(yǎng)箱,。還有的設(shè)計生產(chǎn)了HEPA過濾器能過濾培養(yǎng)箱內(nèi)空氣,,可過濾除去99.97%的0.3/an以上的顆粒,,此外,,還有設(shè)計了能使箱內(nèi)達到高溫濕熱的環(huán)境從而殺死污染微生物,達到消毒滅菌目的的培養(yǎng)箱,。
二氧化碳培養(yǎng)箱零點飄移的監(jiān)控和零點的調(diào)整
培養(yǎng)箱使用過程中,,二氧化碳零點會發(fā)生自然飄移現(xiàn)象,,這種現(xiàn)象不能在箱面氣體顯示框中表現(xiàn)出來,使用者也不易覺察到飄移結(jié)果,。二氧化碳零點是否飄移,,可通過二氧化碳氣體測試儀,從控制盤上的采樣口可以采到培養(yǎng)箱內(nèi)的氣體,,然后用氣體色譜儀就可以測到二氧化碳濃度了,。