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來看看專業(yè)人員使用程序降溫盒的方法與經(jīng)驗(yàn)
閱讀：6167 發(fā)布時(shí)間：2021-9-14
程序降溫盒為成功的細(xì)胞低溫貯藏和回收提供所需的關(guān)鍵的,，可重復(fù)的-1℃/分鐘的冷凍率,。僅需要100%異丙醇和機(jī)械式冷凍機(jī)。盒子標(biāo)簽上帶有圖形化的使用步驟說明,?？梢匀菁{18個(gè)管瓶。支架可防止管瓶與醇接觸——以防止由于芯吸作用而造成污染,、弄掉標(biāo)簽或在管瓶上留下痕跡,。裝有醇的容器可在室溫下存儲，從而節(jié)約了冷凍空間,。
程序降溫盒使用方法與經(jīng)驗(yàn)：
程序降溫盒經(jīng)驗(yàn)1：凍存盒外表面有刻度的吧,，異丙醇液面要高于最底線。
凍存盒肯定是先放在室溫,，然后放進(jìn)去細(xì)胞,，置于-80，利用異丙醇實(shí)現(xiàn)梯度降溫啊,。
程序降溫盒經(jīng)驗(yàn)2：實(shí)驗(yàn)室凍存盒平時(shí)放4度,，需要凍細(xì)胞時(shí)直接拿出來用就可以了。第二天轉(zhuǎn)移至液氮,，貴重的細(xì)胞盡快轉(zhuǎn)移,，不然會影響復(fù)蘇成活率的。一般是用5次就更換一下異丙醇?，F(xiàn)在也有一些商品化凍存液可以直接丟進(jìn)-80的,，很方便，效果也不錯的,。
程序降溫盒經(jīng)驗(yàn)3：異丙醇的量是要保證的,，不能低于表明的線，否則不能起到很好的程序性降溫作用,，我們是在4度放置,，放了細(xì)胞后立馬放到-80度冰箱，第二天再轉(zhuǎn)移到液氮,，效果很不錯,。
異丙醇熔點(diǎn)：-87.9度的色透明具有乙醇?xì)馕兜目扇夹杂卸疽后w。注意了有可燃性!急性毒性：口服-大鼠LD50:5840毫克/公斤;口服-小鼠LC50:3600毫克/公斤,。刺激數(shù)據(jù)：眼睛-兔子100毫克/!請注意清理!
程序降溫盒經(jīng)驗(yàn)4：應(yīng)該不可以把凍存盒放4°的,，因?yàn)樘荻冉禍氐钠鹗键c(diǎn)是室溫20°左右，所以從-80℃拿出來的凍存盒應(yīng)該現(xiàn)在室溫靜置一段時(shí)間待其恢復(fù)到室溫再使用,。而其中的異丙醇應(yīng)使用6~7此后更換一次,，而且保證液體量達(dá)到刻度線，否則降溫效果會受到影響,。
程序降溫盒經(jīng)驗(yàn)5：凍存盒里的異丙醇一般是250ml,，低于刻度了要加上，理論上是5次以后更換異丙醇,，但是異丙醇對環(huán)境有害,，我們可以多用幾次，只是少了的時(shí)候要加滿,。還有凍存液里面的DMSO對細(xì)胞有毒性,，尤其是室溫的時(shí)候，所以凍存盒和凍存液先放4°,，等把細(xì)胞用凍存液重懸好了放在凍存盒里,，還放回4°，等到出細(xì)胞間的時(shí)候再拿到-80°里面保存,。過夜再轉(zhuǎn)入液氮,。
程序降溫盒這個(gè)梯度降溫可大大提高細(xì)胞凍存的存活率，由于程序降溫盒內(nèi)存在100%濃度的異丙醇和泡沫內(nèi)襯,，因此程序降溫盒也可以用于細(xì)胞復(fù)蘇,。