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來看看專業(yè)人員使用程序降溫盒的方法與經(jīng)驗
閱讀：6441 發(fā)布時間：2021-9-14
程序降溫盒為成功的細胞低溫貯藏和回收提供所需的關(guān)鍵的，可重復的-1℃/分鐘的冷凍率,。僅需要100%異丙醇和機械式冷凍機,。盒子標簽上帶有圖形化的使用步驟說明,。可以容納18個管瓶,。支架可防止管瓶與醇接觸——以防止由于芯吸作用而造成污染,、弄掉標簽或在管瓶上留下痕跡。裝有醇的容器可在室溫下存儲,，從而節(jié)約了冷凍空間,。
程序降溫盒使用方法與經(jīng)驗：
程序降溫盒經(jīng)驗1：凍存盒外表面有刻度的吧，異丙醇液面要高于最底線,。
凍存盒肯定是先放在室溫,，然后放進去細胞，置于-80,，利用異丙醇實現(xiàn)梯度降溫啊,。
程序降溫盒經(jīng)驗2：實驗室凍存盒平時放4度，需要凍細胞時直接拿出來用就可以了,。第二天轉(zhuǎn)移至液氮,，貴重的細胞盡快轉(zhuǎn)移,，不然會影響復蘇成活率的。一般是用5次就更換一下異丙醇?，F(xiàn)在也有一些商品化凍存液可以直接丟進-80的,，很方便，效果也不錯的,。
程序降溫盒經(jīng)驗3：異丙醇的量是要保證的,，不能低于表明的線，否則不能起到很好的程序性降溫作用,，我們是在4度放置,，放了細胞后立馬放到-80度冰箱，第二天再轉(zhuǎn)移到液氮,，效果很不錯。
異丙醇熔點：-87.9度的色透明具有乙醇氣味的可燃性有毒液體,。注意了有可燃性!急性毒性：口服-大鼠LD50:5840毫克/公斤;口服-小鼠LC50:3600毫克/公斤,。刺激數(shù)據(jù)：眼睛-兔子100毫克/!請注意清理!
程序降溫盒經(jīng)驗4：應該不可以把凍存盒放4°的，因為梯度降溫的起始點是室溫20°左右,，所以從-80℃拿出來的凍存盒應該現(xiàn)在室溫靜置一段時間待其恢復到室溫再使用,。而其中的異丙醇應使用6~7此后更換一次，而且保證液體量達到刻度線,，否則降溫效果會受到影響,。
程序降溫盒經(jīng)驗5：凍存盒里的異丙醇一般是250ml，低于刻度了要加上,，理論上是5次以后更換異丙醇,，但是異丙醇對環(huán)境有害，我們可以多用幾次,，只是少了的時候要加滿,。還有凍存液里面的DMSO對細胞有毒性，尤其是室溫的時候,，所以凍存盒和凍存液先放4°,，等把細胞用凍存液重懸好了放在凍存盒里，還放回4°,，等到出細胞間的時候再拿到-80°里面保存,。過夜再轉(zhuǎn)入液氮。
程序降溫盒這個梯度降溫可大大提高細胞凍存的存活率,，由于程序降溫盒內(nèi)存在100%濃度的異丙醇和泡沫內(nèi)襯,，因此程序降溫盒也可以用于細胞復蘇。