超高效液相色譜作為一種先進(jìn)的分析技術(shù)，具有高分辨率,、高靈敏度和高效率的特點(diǎn),，在各個(gè)領(lǐng)域中發(fā)揮著重要的作用。通過(guò)自動(dòng)控制純?nèi)軇┗驖馊芤旱谋壤齺?lái)在線配制所需要的流動(dòng)相，極大地縮短了準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)所需要的時(shí)間,。它可讓您充分利用ACQUITY UPLC H-Class系統(tǒng)四元混合能力的優(yōu)勢(shì),，同時(shí)還能管理所選流動(dòng)相的理想pH和離子強(qiáng)度要求。
超高效液相色譜操作流程的詳細(xì)介紹：
1,、樣品制備
樣本轉(zhuǎn)換：將固體樣本轉(zhuǎn)換為液體形式,，簡(jiǎn)化復(fù)雜混合物，去除干擾基質(zhì),，濃縮或稀釋,。
處理方法：包括離心、過(guò)濾,、蛋白沉淀,、液-液萃取、固相萃取,、免疫親和捕獲,、蛋白質(zhì)消化和衍生化等多種方法。例如,，過(guò)濾可以去除樣本中的顆粒,，延長(zhǎng)色譜柱的使用壽命。
2,、流動(dòng)相準(zhǔn)備
溶劑純化：使用的溶劑必須為色譜純,，并經(jīng)過(guò)0.45μm膜過(guò)濾。緩沖鹽等可以是分析純或優(yōu)級(jí)純,。
脫氣處理：溶劑及樣品使用前需超聲脫氣30分鐘,，以避免氣泡影響分離效果。
3,、系統(tǒng)設(shè)置
硬件檢查：確保色譜系統(tǒng)的各連接部位密封良好,，無(wú)泄漏現(xiàn)象。檢查并維護(hù)泵,、進(jìn)樣器,、色譜柱和檢測(cè)器等關(guān)鍵部件。
系統(tǒng)預(yù)熱：開(kāi)啟設(shè)備,，預(yù)熱并穩(wěn)定系統(tǒng),，以確保分析過(guò)程中溫度恒定。
4,、方法開(kāi)發(fā)
方法選擇：如果已有現(xiàn)成的分析方法,，可以直接使用；如果沒(méi)有,，需要通過(guò)篩選各種色譜柱和洗脫液條件來(lái)開(kāi)發(fā)新方法,。
優(yōu)化與驗(yàn)證：對(duì)選定的方法進(jìn)行優(yōu)化,，并進(jìn)行穩(wěn)健性測(cè)試和方法驗(yàn)證，確保方法的可靠性和重現(xiàn)性,。
5,、數(shù)據(jù)分析
數(shù)據(jù)采集：通過(guò)檢測(cè)器測(cè)量從色譜柱洗脫的分析物信號(hào)，并利用色譜數(shù)據(jù)系統(tǒng)進(jìn)行轉(zhuǎn)換,，生成色譜圖,。
結(jié)果分析：根據(jù)色譜圖的保留時(shí)間、峰面積等參數(shù)進(jìn)行分析和定量,，必要時(shí)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線校正,。
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