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如果一個實驗生涯沒有在實驗室里翻箱倒柜找移液器的經(jīng)歷,,那就太遺憾了,! 作為實驗室的“必需品",,每天移液的次數(shù)可能達到上千次甚至上萬次,如果移液器不好用或者不準確,,那么就會感到非常難受,。因此,“保護"移液器也是保護自己,! |
1,、設(shè)定移液體積:
從大容量調(diào)整到小容量時,逆時針旋轉(zhuǎn)刻度到所需容量,;
從小容量調(diào)整到大容量時,,應(yīng)先順時針旋轉(zhuǎn)調(diào)至超過設(shè)定體積刻度,然后再回到所需容量,,這樣可以保證移液的精度,。
2、匹配安裝吸頭:
吸頭選擇原則:低吸附,、錐度好,、同心度好。
對于單通道移液器,,將移液器垂直插入吸頭,,輕輕按壓并左右旋轉(zhuǎn),上緊即可,;
對于多通道移液器,,將移液器的第一通道與第一個吸頭對準,稍微傾斜插入,,前后輕輕晃動確保安裝牢固,。
(注意:請不要重復(fù)撞擊移液器,因為長期這樣操作可能導(dǎo)致移液器的零部件因撞擊變松動,,甚至損壞刻度調(diào)節(jié)旋鈕,。
3、吸液和放液:
吸液前槍頭現(xiàn)在液體中預(yù)潤洗2-3次確保移液的精度和準度,;
吸液時,,要確保移液器垂直且吸頭浸沒盡量淺一些,具體的浸入深度還應(yīng)根據(jù)盛放液體的容器大小靈活掌握,;
放液時,,吸頭尖靠在容器內(nèi)壁(特別是對于20 μL 以下的體積),移液器角度 20° - 45°,。體積低于 10 μL 直接放液到容器底部,;吸液和放液時務(wù)必要慢吸慢放,以免液體進入吸頭過快而沖入到移液器內(nèi)部腐蝕活塞。
4,、移液方式:
正向移液:
推薦用于水溶液,,如緩沖液、稀釋酸或堿,,該技術(shù)通常用于移液和將樣品或試劑混合到另一種液體中,。
反向移液:
該技術(shù)通常與空氣置換移液器一起使用,并推薦用于小體積的精確移液,。反向移液避免了樣品飛濺,、起泡或氣泡形成的風(fēng)險。
重復(fù)移液:
該技術(shù)用于相同體積的重復(fù)分配,,是將試劑添加到微孔板的管或孔中的理想選擇,。
1,、如果長時間不使用,要把移液器的量程調(diào)至最大刻度,讓彈簧處于松弛狀態(tài),以保護彈簧;
2,、定期清潔移液器外壁,可以使用95%酒精或60%異丙醇進行清潔,再用蒸餾水擦拭,,自然晾干,;
3,、在使用時要檢查是否有泄漏現(xiàn)象,一種方法是在吸取液體后懸空垂直幾秒,,看看液面是否下降,如果漏液,,則檢查吸液嘴是否匹配,,以及彈簧活塞是否正常;
4,、當移液器的吸嘴有液體時,,嚴禁水平或倒置放置,,以防液體流入活塞室并腐蝕移液器的活塞,;
5、在安裝吸頭時,,不要過度用力,更不能采用剁吸頭的方式進行安裝,。
移液器和測試使用的蒸餾水應(yīng)提前4小時放進恒溫器室,,校準應(yīng)在無通風(fēng)的房間操作且室內(nèi)溫度20+5℃,濕度40%一70%RH,。 |
一,、所需設(shè)備和物品:
萬分之一電子天平、蒸餾水,、校準工具,、待校準移液器;
二,、步驟:
1,、打開電子天平,進行零點校準:將小燒杯放在天平上,,等待天平穩(wěn)定后,,按下歸零鍵進行歸零;
2,、將移液器的容量調(diào)至所需的檢測點,。檢測點通常選擇最小、中間和最大容量值之一,,或者某個特定容量點,;(這里我們以10-100微升的hipette移液器為例)
3,、安裝適當?shù)奈鹤煸谝埔浩魃希瑢σ埔浩鞯臉岊^進行預(yù)沖洗,,使用移液器將蒸餾水移至天平上的小燒杯,,進行稱重,容積應(yīng)與所選檢測容量點相符,,如果相差偏大則需要校準,;
4、校準:拔掉推出器,,用校準工具對準移液器圓形口;
一只手向下按住的同時旋轉(zhuǎn)量程鎖,,如果測量數(shù)偏大則順時針旋轉(zhuǎn),側(cè)量數(shù)偏小則逆時針,,然后重復(fù)之前的操作,,直至測量數(shù)與容積基本一致即可。
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