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一,、3D基質膠細胞系細胞培養(yǎng)套裝(不含酚紅)產(chǎn)品說明
1、貨號:B-P-00002-2,、B-P-00002-4,、B-P-00002-10
2、規(guī)格:2ml-kit,、4ml-kit ,、10ml-kit
3、儲存條件:常溫運輸,,4℃保存,,可保存兩年
二、3D基質膠細胞系細胞培養(yǎng)套裝(不含酚紅)產(chǎn)品描述
3D細胞培養(yǎng)基質膠套裝是一套完整設計的微環(huán)境的3D細胞培養(yǎng)及相關應用試劑,。易于使用,、可*控制生物分子修飾和凝膠硬度,可用于多種細胞培養(yǎng)應用,。聚合物可以快速凝膠化速度生成基質膠,。
(3D基質膠材料為100%植物源材料,無動物來源)
試劑的制備
1,、A Gel:將A Gel置于 37 ℃水浴中至少 10 分鐘直至*解凍,。
2、C 緩沖液 (1X):使用前用冷的無血清培養(yǎng)基(例如無血清 DMEM)將10X C 緩沖液新鮮稀釋至 1X C 緩沖液,。(做不稀C緩沖區(qū)與PBS)
3,、d緩沖液(1X) :新鮮稀10X d緩沖用冷1× PBS至1X d緩沖之前使用。
3D 細胞培養(yǎng)的制備
所有步驟均在層流中進行,并按指示添加每個組分的體積比,。
1. 將導熱片放在冰袋上,。該片材可以快速均勻地冷卻培養(yǎng)板。
2. 重懸于1×10 5 ?10 7個細胞在1毫升混合物生長介質和甲凝膠在1:1成的比例,。例如,,在 500 m L 生長培養(yǎng)基和 500 m L A Gel 中重懸 1×10 5 個細胞。
注意:在適當?shù)呐囵B(yǎng)基和培養(yǎng)條件下培養(yǎng)細胞,。貼壁細胞應在~80% 匯合度下培養(yǎng),。
3. 將培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿放在導熱片/冰袋上。將步驟 2 中的20-40毫升細胞懸浮液混合物添加到每個孔中,。所述混合物應該形成凝膠后5分鐘,。注:測試凝膠形成通過輕觸凝膠用移液管尖,和膠線應收回從凝膠表面時提示無法拉出,。
4. 一旦凝膠形成,,加入 1mL 冷的 1X C 緩沖液以覆蓋圓頂 15分鐘。
5. 經(jīng)過15分鐘溫育后,,小心地取代C緩沖區(qū)與培養(yǎng)平臺,。第二天更換培養(yǎng)基。
6. 將 細胞在CO 2培養(yǎng)箱中37°C培養(yǎng)7 至14 天,,并用顯微鏡觀察球狀體的形成,。培養(yǎng)基可以根據(jù)細胞正常生長的需要每隔一天更換一次。
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