ZETA LIFE高效率轉(zhuǎn)染試劑5ml

一,、產(chǎn)品說明：

1、產(chǎn)品名稱

Advanced DNA RNA Transfection Reagent

2,、包裝規(guī)格

貨號：AD600500

規(guī)格：5ml

3,、儲存條件

常溫運輸，4℃保存,，可保存兩年,，拒絕反復(fù)凍融。

二,、使用說明：

1,、材料準備

RNA 濃度 20 uM /L

質(zhì)粒 DNA 濃度 300 ng-2 ug/ul（注意：①溶解于無菌雙蒸水或超純水,；②無內(nèi)毒素 ）

2、操作步驟

提前 1 天接種細胞：細胞匯合度在 60-80%左右,，再進行轉(zhuǎn)染,。

核酸復(fù)合物制備：將核酸與轉(zhuǎn)染試劑按照 1:1 關(guān)系直接混合，用移液器吹吸 10-15 次混勻,，室溫靜 止 10-15 分鐘,。

在細胞培養(yǎng)基中加入核酸復(fù)合物：根據(jù)參考用量在細胞中加入核酸復(fù)合物，并輕輕混勻,；細胞培養(yǎng)基 里面可以含有血清,。

細胞換液：轉(zhuǎn)染 24 小時后對細胞進行正常換液，懸浮細胞轉(zhuǎn)染過程中不用換液,。

分析結(jié)果：質(zhì)粒 DNA 轉(zhuǎn)染 48-72 小時后熒光檢測轉(zhuǎn)染效率,，48-96 小時檢測 mRNA 或蛋白表達。若 進行穩(wěn)定表達細胞株的篩選,，則在轉(zhuǎn)染后 24-48 小時左右加入適量的藥物進行篩選,。siRNA 轉(zhuǎn)染后 9 小時熒光檢測轉(zhuǎn)染效率，48-72 小時檢測 mRNA 或蛋白表達,。

三,、注意事項：

1、質(zhì)粒 DNA 必須溶解于無菌雙蒸水或超純水,，但不能溶解于提取試劑盒提供的 Buffer,。溶解于 Buffer 的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染效率會下降 80%左右，甚至?xí)D(zhuǎn)染失敗,。

2,、質(zhì)粒必須去除內(nèi)毒素，內(nèi)毒素對細胞將產(chǎn)生很大的細胞毒性,，會導(dǎo)致轉(zhuǎn)染效率下降 70%-80%左 右,，甚至導(dǎo)致轉(zhuǎn)染失敗（推薦使用 Qiagen,、TIANGEN,、Omega 去內(nèi)毒素質(zhì)粒提取試劑盒）。

3,、復(fù)合物的制備過程中是絕對不能用其他任何試劑對核酸或轉(zhuǎn)染試劑進行稀釋,，只需將核酸和轉(zhuǎn)染 試劑兩者按 1:1 比例直接混合，如果進行了稀釋會導(dǎo)致轉(zhuǎn)染失,。

4,、轉(zhuǎn)染試劑與核酸混勻后用移液器吹打 10-15 次，室溫孵育 10-15 分鐘后即可加入細胞培養(yǎng)板。

5,、轉(zhuǎn)染 24 小時后進行正常換液,，不能像 Lipo2000 一樣轉(zhuǎn)染 4-6 小時后換液。

6,、原代細胞,、免疫細胞轉(zhuǎn)染時，細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基里面不能含有雙抗培養(yǎng)基,。

轉(zhuǎn)染操作示意圖

不同轉(zhuǎn)染實驗各成分推薦用量

四,、優(yōu)秀表現(xiàn)

Zeta Life多肽小分子轉(zhuǎn)染試劑的尺寸大小是傳統(tǒng)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑體積的1/10;

本轉(zhuǎn)染試劑是通過細胞內(nèi)?和細胞主動吸收進入細胞；

本轉(zhuǎn)染試劑進入后對細胞膜無物理性損傷,，不易出現(xiàn)細胞變形,，保持高的細胞活力；

不激活細胞表面或細胞體內(nèi)marker;

可反映真實的細胞通路蛋白原始數(shù)據(jù),；

可轉(zhuǎn)染免疫細胞,、懸浮細胞等。

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Zeta Life Advanced DNA RNA轉(zhuǎn)染試劑系列：                    

品牌：美國Zeta Life  貨號：AD600025  （Zeta Life原代細胞轉(zhuǎn)染試劑）0.25ml/詢價

品牌：美國Zeta Life  貨號：AD600050  （Zeta Life真核細胞轉(zhuǎn)染試劑）0.5ml/詢價

品牌：美國Zeta Life  貨號：AD600075  （Zeta Life可代謝轉(zhuǎn)染試劑）0.75ml/詢價

品牌：美國Zeta Life  貨號：AD600150  （Zeta Life免疫細胞轉(zhuǎn)染試劑）1.5ml/詢價

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品牌：美國Zeta Life  貨號：AD601000  （Zeta LifeRAW264.7細胞轉(zhuǎn)染試劑）10ml/詢價

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