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中級(jí)會(huì)員 | 第5年

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血清系列
細(xì)胞轉(zhuǎn)染
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細(xì)胞凍存
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細(xì)胞因子分子
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細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)2021/10/29
簡(jiǎn)介一.細(xì)胞培養(yǎng)的基本原理細(xì)胞培養(yǎng)是用酶消化法將組織碎塊分離成單個(gè)細(xì)胞,用培養(yǎng)基制成細(xì)胞懸液,,在體外適宜條件下,,使細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖,并保留其一定的結(jié)構(gòu)和功能特性,。細(xì)胞培養(yǎng)與組織培養(yǎng)、器官培養(yǎng)主要不同點(diǎn)在于...
MDCK細(xì)胞培養(yǎng)2021/10/29
簡(jiǎn)介一,、目的MDCK細(xì)胞培養(yǎng)是分離流感病毒及相關(guān)研究實(shí)驗(yàn)的基本技術(shù),。疾控中心的所有技術(shù)人員,必須按照本文件相關(guān)的操作規(guī)程進(jìn)行操作,。二,、適用范圍適用于疾控中心所有技術(shù)人員。三,、程序(一)生物安全要求實(shí)驗(yàn)...
雙重染色法免疫熒光組織化學(xué)染色步驟2021/10/26
材料與儀器:原代培養(yǎng)胚胎14天大鼠端腦細(xì)胞,,F(xiàn)ITC,TRITC實(shí)驗(yàn)步驟:雙重染色法免疫熒光組織化學(xué)染色步驟若在同一標(biāo)本中有兩A和B種抗原需要同時(shí)顯示,,A抗原的抗體用FITC標(biāo)記,,B抗原的抗體用TRI...
免疫熒光(Immunofluorescence, IF)實(shí)驗(yàn)方法2021/10/26
材料與儀器:免疫熒光技術(shù)是在免疫學(xué)、生物化學(xué)和顯微鏡技術(shù)的基礎(chǔ)上建立起來(lái)的一項(xiàng)技術(shù),。它是根據(jù)抗原抗體反應(yīng)的原理,,先將已知的抗原或抗體標(biāo)記上熒光基團(tuán),再用這種熒光抗體(或抗原)作為探針檢查細(xì)胞或組織內(nèi)的...
免疫熒光技術(shù)-間接法2021/10/26
材料與儀器:抗體PBS伊文氏蘭顯微鏡實(shí)驗(yàn)步驟:1.標(biāo)本固定后,,PBS洗滌3x3分鐘,;2.滴加一抗,37℃40分鐘或4℃過(guò)夜,;3.PBS洗3x3分鐘,;4.滴加熒光標(biāo)記二抗37℃,40分鐘,;5.PBS洗3...
免疫熒光技術(shù)-直接法2021/10/26
材料與儀器:抗體PBS伊文氏蘭顯微鏡實(shí)驗(yàn)步驟:1.標(biāo)本經(jīng)固定后,,PBS洗滌3×3分鐘;2.加熒光素標(biāo)記的抗體,,濕盒內(nèi)37℃孵育50分鐘,;3.PBS洗滌3×3分鐘;4.0.1%伊文氏蘭復(fù)染,;5.PBS洗...
冰凍切片和石蠟切片各自的優(yōu)劣之處是什么,?2021/10/26
冰凍切片和石蠟切片各自的優(yōu)劣之處1、從一抗的選擇方面來(lái)看,。有的一抗既能做石蠟切片又能做冰凍切片,,而有的一抗只能做冰凍切片,關(guān)鍵取決于所要檢測(cè)的抗原穩(wěn)定性,,有的抗原不穩(wěn)定,,經(jīng)過(guò)組織固定,脫水,、透明,、浸蠟...
細(xì)胞不長(zhǎng),,這些方面您注意了嗎?2021/10/25
Q1培養(yǎng)液pH對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響,?答:由于大多數(shù)細(xì)胞適宜pH為7.2-7.4,,偏離此范圍可能對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)將產(chǎn)生有害的影響,目前也有些無(wú)血清培養(yǎng)基或者轉(zhuǎn)染用的培養(yǎng)基PH值會(huì)在6.5左右,。因?yàn)楦鞣N細(xì)胞對(duì)pH的...
NGS建庫(kù)人都在用的文庫(kù)質(zhì)量評(píng)定方法,,你都知道嗎,?2021/10/25
高通量測(cè)序(NextGenerationSequencing,NGS)近年來(lái)飛速發(fā)展,,在各個(gè)領(lǐng)域已被廣泛應(yīng)用,。而文庫(kù)的制備是NGS技術(shù)中極為重要的步驟。所謂文庫(kù)制備(LibraryPreparatio...
病原微生物提取的方法有哪些,?2021/10/25
數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)據(jù)WHO統(tǒng)計(jì),全球感染性疾病導(dǎo)致的患者死亡占全部死因的25%以上,,在中國(guó),,感染性疾病占所有疾病的50%以上,75%造血系統(tǒng)腫瘤患者和50%實(shí)體腫瘤患者死于感染,,膿毒癥(嚴(yán)重感染)患者病死率高達(dá)...
常見(jiàn)的DNA損傷類(lèi)型有哪些?2021/10/25
說(shuō)起DNA損傷修復(fù),,相信大家都很熟悉,,但小編今日還是要跟大家再?lài)Z嘮這個(gè)話(huà)題,講講在二代建庫(kù)中,,如果DNA存在損傷,,那常見(jiàn)的損傷類(lèi)型有哪些呢,?而這些損傷又是如何進(jìn)行修復(fù)的呢?損傷的形成常見(jiàn)的DNA損傷有...
化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞進(jìn)行質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化的原理2021/10/25
背景介紹將質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化入細(xì)菌的過(guò)程稱(chēng)為轉(zhuǎn)化,。轉(zhuǎn)化通常有兩種方法:化學(xué)轉(zhuǎn)化法和電穿孔法,。電穿孔法的轉(zhuǎn)化率高達(dá)109~1010個(gè)轉(zhuǎn)化子/μg質(zhì)粒DNA,轉(zhuǎn)化率比化學(xué)轉(zhuǎn)化法高,,當(dāng)可能得到的每一個(gè)克隆都非常...
ELISA雙抗體夾心法2021/10/22
簡(jiǎn)介ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記,。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,,又保留酶的活性,。受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體...
蛋白質(zhì)免疫印跡實(shí)驗(yàn)方法原理步驟及注意事項(xiàng)2021/10/22
蛋白質(zhì)免疫印跡(WesternBlot|WB)實(shí)驗(yàn)方法原理步驟及注意事項(xiàng)一:蛋白提取1、組織蛋白提取1)所需器材:制冰機(jī),、標(biāo)記筆,、兩套1.5mlEP管(最好高溫高壓處理)、一個(gè)大冰盒,、一個(gè)1.5mlE...
非基因組DNA的提取2021/10/22
一、DNA提取方法簡(jiǎn)介1,、基因組DNA的提取1.1,、CTAB法1.2、SDS法1.3,、其它2,、非基因組DNA的提取2.1、質(zhì)粒DNA的提取2.1.1,、堿裂解法2.1.2,、煮沸法2.2、線(xiàn)粒體,、葉綠體D...

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