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從原理到實操,,蝦青素抗肝纖維化實驗流程?。?)

時間:2025/4/17閱讀:78
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3 C57小鼠肝纖維化模型每周監(jiān)測
在肝纖維化模型建立過程中,每周系統(tǒng)監(jiān)測小鼠的體重,、活動度及毛發(fā)狀態(tài)是評估模型進展,、藥物干預效果及動物福利的關鍵環(huán)節(jié)。以下為具體操作流程及注意事項:


3.1 監(jiān)測頻率與時間點

  • 監(jiān)測頻率:每周固定時間點(如每周一上午9:00-11:00)監(jiān)測1次,。

  • 監(jiān)測周期:

模型誘導期:DMN注射開始至建模完成(通常4-6周),。  

干預治療期:給藥開始至實驗終點(通常4-8周)。  


3.2 具體監(jiān)測方法與記錄標準

3.2.1 體重

操作步驟:

1. 設備準備:使用精度0.1 g的電子天平,,校準歸零,。

2. 小鼠固定:

  • 輕柔抓取小鼠尾部,將其置于專用稱量盒(底部鋪濾紙防滑),。  

  • 避免抓握腹部(可能加劇肝區(qū)疼痛),。  

3. 稱量記錄:待數(shù)值穩(wěn)定后記錄體重(單位:g),,精確至小數(shù)點后1位。

4. 清潔消毒:每次稱量后用75%酒精擦拭稱量盒,,防止交叉污染,。  

5. 計算體重變化率} (%) = {本周體重} - {上周體重}}/{上周體重}} * 100%

6. 異常判定:

  • 顯著下降:連續(xù)2周體重降幅≥10%,或單周降幅≥15%,。

  • 顯著上升:排除腹水后,,體重增幅≥20%(可能提示代謝異常)。  


3.2.2 活動度評估

觀察指標:

  • 自主活動:在開放場(如30 cm×30 cm透明箱)中觀察5分鐘,,記錄以下行為:

  • 水平運動:穿越區(qū)域次數(shù)(四肢全部進入新區(qū)域計1次),。  

  • 垂直探索:前肢離地站立次數(shù)(持續(xù)≥1秒)。  

  • 靜止時間:無主動移動的累計時間(秒),。  

  • 應激反應:抓取時掙扎強度(輕度/中度/劇烈),。


評分標準(參考改良的Murphy評分):
從原理到實操,蝦青素抗肝纖維化實驗流程?。?)


記錄與處理:

評分≥2分且持續(xù)48小時,,需考慮提前優(yōu)逝,。


3.2.3 毛發(fā)狀態(tài)觀察

觀察指標:

  • 毛發(fā)蓬松度:正常(緊貼皮膚) vs. 蓬松(豎立如“炸毛"),。

  • 光澤度:光滑有光澤 vs. 暗淡無光。

  • 脫毛區(qū)域:記錄脫毛部位(頭頸部,、背部,、腹部)及面積(直徑cm)。

  • 皮膚損傷:紅斑,、結痂,、潰瘍等。


分級記錄:

從原理到實操,,蝦青素抗肝纖維化實驗流程?。?)


處理措施:
  • 1級異常:加強墊料清潔,補充維生素(如飲水中添加復合維生素B),。

  • 2級異常:結合體重和活動度評估,,必要時終止實驗。


3.3 注意事項

1. 減少應激:

  • 固定監(jiān)測人員,,操作輕柔,,避免噪音干擾。  

  • 稱重與行為學觀察在不同時間段進行(如上午稱重,,下午行為測試),。  

2. 環(huán)境控制:

維持SPF級環(huán)境(溫度22-24℃,濕度50-60%),,避免環(huán)境波動影響數(shù)據(jù),。  

3. 倫理閾值:

體重下降≥20%,、活動度評分≥2持續(xù)48小時或嚴重皮膚損傷,需立即啟動優(yōu)逝程序,。  


3.4 常見問題與解決方案

從原理到實操,,蝦青素抗肝纖維化實驗流程!(3)

通過系統(tǒng)監(jiān)測體重,、活動度及毛發(fā)狀態(tài),,可全面評估肝纖維化模型小鼠的生理狀態(tài),為實驗結果的可靠性及倫理合規(guī)性提供保障,。


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