細(xì)胞的體外培養(yǎng)需要依附在人工附著物上,，大多數(shù)脊椎動物細(xì)胞在人工附著物上會呈現(xiàn)為單層生長的狀態(tài)。

所謂的人工附著物,，就是常見的多孔板,、培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿,。

用什么類型的附著物來培養(yǎng)細(xì)胞,，是有什么依據(jù)的呢？這一期內(nèi)容就講講這個話題,。

基本概念

從材料分類上看,，常見的細(xì)胞培養(yǎng)附著物分為一次性的塑料和玻璃。

先說玻璃,，成本低,、可重復(fù)使用,，透光性好，但由于其清洗過程復(fù)雜,，不易保存,，現(xiàn)在已逐漸被一次性塑料取代了,。

一次性塑料的主要成份是聚丙乙烯，由人工合成,，質(zhì)地均勻,，產(chǎn)量大成本低，能為細(xì)胞提供一個良好的生長表面,。

這里有一個小細(xì)節(jié),，有的塑料培養(yǎng)器皿會標(biāo)注“已表面處理“，這是什么意思呢,？

因為聚丙乙烯生產(chǎn)好以后,，其表面是疏水性的，這不利于細(xì)胞貼壁生長,，因此,，需要進行特殊的工藝處理，例如射線照射,、電離輻射,，這樣處理過的表面細(xì)胞才能更好的貼在上面生長。

選擇器皿的原則

選擇用多孔板培養(yǎng)細(xì)胞還是培養(yǎng)瓶培養(yǎng)細(xì)胞,，是根據(jù)你培養(yǎng)細(xì)胞的目的來決定的,。

如果培養(yǎng)細(xì)胞的目的是通過細(xì)胞倍增，最終獲得大量細(xì)胞或細(xì)胞分泌物,，則應(yīng)該使用培養(yǎng)皿,、培養(yǎng)瓶來培養(yǎng)細(xì)胞。

如果目的是為了進行微量的,、多次的重復(fù)實驗來分析細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)物,，則應(yīng)該使用多孔板來培養(yǎng)。

確定培養(yǎng)目的以后,，應(yīng)該根據(jù)具體情況選擇不同規(guī)格的器皿,。以下分類說明。

1 選擇培養(yǎng)瓶,、培養(yǎng)皿培養(yǎng)細(xì)胞

首先,，根據(jù)期望獲得的細(xì)胞產(chǎn)量來選擇，培養(yǎng)瓶是通過表面積來命名的,，例如T25,、T75、T175,，數(shù)字就是表面積,，25就是25cm2，如此類推,；

培養(yǎng)皿是按照其直徑來命名的,，例如3.5cm,、9cm。以下,，是按照不同規(guī)格的培養(yǎng)器皿所能培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量繪制的參考圖,，有興趣的同學(xué)可以保存下來以后用。

其次,，根據(jù)實驗操作熟練程度來選擇，培養(yǎng)皿的操作比較方便,，不管是換液,、傳代、還是收獲細(xì)胞,，但因為其開口很大,，所以容易污染，如果你是新手,，不建議直接用培養(yǎng)皿養(yǎng)細(xì)胞,。

最后,，如果選擇培養(yǎng)瓶培養(yǎng),，還應(yīng)該盡量選擇有斜肩設(shè)計、帶透氣孔瓶蓋的型號,。

前者可以避免培養(yǎng)瓶平放后,，過多的培養(yǎng)基接觸瓶蓋造成污染，后者可以保持內(nèi)外的二氧化碳濃度一致,。

如果瓶蓋不透氣,，那在放進培養(yǎng)箱時，應(yīng)擰松一圈,，以便內(nèi)外氣體能順利交換,。

2 選擇多孔板培養(yǎng)細(xì)胞

首先，也是要判斷你的實驗需要多少細(xì)胞來進行分析,，以此來選擇多孔板的規(guī)格,。大家同樣可以參照上面的圖表。

有極個別的孔板,，孔底部是錐形底或圓底,，這種規(guī)格的多孔板適用于非組織型的細(xì)胞培養(yǎng)，對于大多數(shù)貼壁生長的細(xì)胞來說不適合,。

選擇好合適的孔板后，在培養(yǎng)階段,，有2點注意事項：

A 多孔板會帶板蓋,，但其密封性不好,，在培養(yǎng)箱內(nèi)會造成邊緣的孔位蒸發(fā)效率過高，進而影響細(xì)胞生長速率,。

有條件的同學(xué),，可以在蓋上板蓋后在縫隙處貼一圈封口膜?；蛘呱釛夁吘壙孜?，并采用添加培養(yǎng)基來代替,。

B 當(dāng)細(xì)胞種入孔內(nèi)以后,，不應(yīng)該再進行過多的震動，例如晃動,、抖動培養(yǎng)板,，而應(yīng)該輕緩的放入培養(yǎng)箱中。

如果培養(yǎng)箱由多人共用,，還應(yīng)該考慮大家頻繁開關(guān)箱門,、拿放孔板造成的震動，這些不利因素都應(yīng)該盡量減少,。

以上就是本期的內(nèi)容,，更多資訊，歡迎點擊安培生物網(wǎng)站鏈接了解更多技術(shù)與產(chǎn)品資訊,。

安培生物致力成為推動生命科學(xué)進步值得信賴的合作者

深圳/湛江安培生物科技有限公司,是一家具有核心的技術(shù)實力,、先進的經(jīng)營管理水平和完善的市場銷售體系的生物高科技企業(yè)?？偛吭O(shè)在廣東,，服務(wù)面向全國。安培生物集進口試劑,、實驗室耗材銷售,、技術(shù)服務(wù)與合約開發(fā)為一體的專業(yè)化高科技公司，旨在為生命科學(xué)的發(fā)展提供較好的產(chǎn)品與服務(wù),。本公司建立了涵蓋分子生物學(xué),、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué),、信號傳導(dǎo)和神經(jīng)科學(xué)等領(lǐng)域的產(chǎn)品供應(yīng)線,，在各個領(lǐng)域內(nèi)向用戶提供較高的水平和質(zhì)量穩(wěn)定的產(chǎn)品，安培生物致力于為廣大的科研機構(gòu),、高等院校等客戶提供各種產(chǎn)品,、技術(shù)支持與服務(wù)。

可以在第一時間為用戶提供比較先進的專業(yè)資訊和完備的產(chǎn)品和物流服務(wù),。 專業(yè)的技術(shù)力量使得我們能夠為廣大用戶提供強大的技術(shù)支持,，深厚的人脈資源使得我們在全國主要城市擁有眾多的合作伙伴,，安培生物非常榮幸能將世界上先進的高科技產(chǎn)品推薦給國內(nèi)從事生物學(xué)領(lǐng)域科研的老師和同仁。作為專業(yè)性的產(chǎn)品供應(yīng)商,，公司出資存?zhèn)淞舜罅楷F(xiàn)貨,，配合優(yōu)秀的銷售隊伍以及專業(yè)的技術(shù)支持，隨時為客戶提供服務(wù),。