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何時(shí)用瓶皿培養(yǎng),,何時(shí)用孔板培養(yǎng)

時(shí)間:2024/4/18閱讀:787
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細(xì)胞的體外培養(yǎng)需要依附在人工附著物上,大多數(shù)脊椎動(dòng)物細(xì)胞在人工附著物上會(huì)呈現(xiàn)為單層生長的狀態(tài),。


所謂的人工附著物,,就是常見的多孔板、培養(yǎng)瓶,、培養(yǎng)皿,。


用什么類型的附著物來培養(yǎng)細(xì)胞,是有什么依據(jù)的呢,?這一期內(nèi)容就講講這個(gè)話題,。


基本概念

從材料分類上看,常見的細(xì)胞培養(yǎng)附著物分為一次性的塑料和玻璃,。


先說玻璃,,成本低、可重復(fù)使用,,透光性好,但由于其清洗過程復(fù)雜,,不易保存,,現(xiàn)在已逐漸被一次性塑料取代了,。


一次性塑料的主要成份是聚丙乙烯,由人工合成,,質(zhì)地均勻,,產(chǎn)量大成本低,能為細(xì)胞提供一個(gè)良好的生長表面,。


這里有一個(gè)小細(xì)節(jié),,有的塑料培養(yǎng)器皿會(huì)標(biāo)注“已表面處理“,這是什么意思呢,?


因?yàn)榫郾蚁┥a(chǎn)好以后,,其表面是疏水性的,這不利于細(xì)胞貼壁生長,,因此,,需要進(jìn)行特殊的工藝處理,例如射線照射,、電離輻射,,這樣處理過的表面細(xì)胞才能更好的貼在上面生長。


選擇器皿的原則

選擇用多孔板培養(yǎng)細(xì)胞還是培養(yǎng)瓶培養(yǎng)細(xì)胞,,是根據(jù)你培養(yǎng)細(xì)胞的目的來決定的,。


如果培養(yǎng)細(xì)胞的目的是通過細(xì)胞倍增,最終獲得大量細(xì)胞或細(xì)胞分泌物,,則應(yīng)該使用培養(yǎng)皿,、培養(yǎng)瓶來培養(yǎng)細(xì)胞。


如果目的是為了進(jìn)行微量的,、多次的重復(fù)實(shí)驗(yàn)來分析細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)物,,則應(yīng)該使用多孔板來培養(yǎng)。


確定培養(yǎng)目的以后,,應(yīng)該根據(jù)具體情況選擇不同規(guī)格的器皿,。以下分類說明。


1 選擇培養(yǎng)瓶,、培養(yǎng)皿培養(yǎng)細(xì)胞

首先,,根據(jù)期望獲得的細(xì)胞產(chǎn)量來選擇,培養(yǎng)瓶是通過表面積來命名的,,例如T25,、T75、T175,,數(shù)字就是表面積,,25就是25cm2,如此類推,;

培養(yǎng)皿是按照其直徑來命名的,,例如3.5cm,、9cm。以下,,是按照不同規(guī)格的培養(yǎng)器皿所能培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量繪制的參考圖,,有興趣的同學(xué)可以保存下來以后用。

何時(shí)用瓶皿培養(yǎng),,何時(shí)用孔板培養(yǎng)

其次,,根據(jù)實(shí)驗(yàn)操作熟練程度來選擇,培養(yǎng)皿的操作比較方便,,不管是換液,、傳代、還是收獲細(xì)胞,,但因?yàn)槠溟_口很大,,所以容易污染,如果你是新手,,不建議直接用培養(yǎng)皿養(yǎng)細(xì)胞,。

何時(shí)用瓶皿培養(yǎng),何時(shí)用孔板培養(yǎng)

最后,,如果選擇培養(yǎng)瓶培養(yǎng),,還應(yīng)該盡量選擇有斜肩設(shè)計(jì)、帶透氣孔瓶蓋的型號(hào),。

前者可以避免培養(yǎng)瓶平放后,,過多的培養(yǎng)基接觸瓶蓋造成污染,后者可以保持內(nèi)外的二氧化碳濃度一致,。

如果瓶蓋不透氣,,那在放進(jìn)培養(yǎng)箱時(shí),應(yīng)擰松一圈,,以便內(nèi)外氣體能順利交換,。

2 選擇多孔板培養(yǎng)細(xì)胞

首先,也是要判斷你的實(shí)驗(yàn)需要多少細(xì)胞來進(jìn)行分析,,以此來選擇多孔板的規(guī)格,。大家同樣可以參照上面的圖表。

有極個(gè)別的孔板,,孔底部是錐形底或圓底,,這種規(guī)格的多孔板適用于非組織型的細(xì)胞培養(yǎng),對(duì)于大多數(shù)貼壁生長的細(xì)胞來說不適合,。

何時(shí)用瓶皿培養(yǎng),,何時(shí)用孔板培養(yǎng)

選擇好合適的孔板后,在培養(yǎng)階段,有2點(diǎn)注意事項(xiàng):

A 多孔板會(huì)帶板蓋,,但其密封性不好,,在培養(yǎng)箱內(nèi)會(huì)造成邊緣的孔位蒸發(fā)效率過高,進(jìn)而影響細(xì)胞生長速率,。

有條件的同學(xué),可以在蓋上板蓋后在縫隙處貼一圈封口膜,?;蛘呱釛夁吘壙孜唬⒉捎锰砑优囵B(yǎng)基來代替,。

B 當(dāng)細(xì)胞種入孔內(nèi)以后,,不應(yīng)該再進(jìn)行過多的震動(dòng),例如晃動(dòng),、抖動(dòng)培養(yǎng)板,,而應(yīng)該輕緩的放入培養(yǎng)箱中。

如果培養(yǎng)箱由多人共用,,還應(yīng)該考慮大家頻繁開關(guān)箱門,、拿放孔板造成的震動(dòng),這些不利因素都應(yīng)該盡量減少,。

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