在培養(yǎng)細(xì)胞過程中,，同學(xué)們最擔(dān)心的就是細(xì)胞污染。因此,，今天給大家分享如何辨別細(xì)胞污染的經(jīng)驗,，趕快學(xué)起來吧~

一、肉眼觀察

把培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿拿起來,，對者光線檢查

●渾濁情況：即使細(xì)胞密度很高,，培養(yǎng)基也應(yīng)該是透明的。輕輕移動或晃動培養(yǎng)瓶,，觀察培養(yǎng)基的渾濁或懸浮情況,，一些霉菌可能會在培養(yǎng)基的表面形成菌落。

●培養(yǎng)基顏色的變化,。酸性條件下,，加了酚紅的培養(yǎng)基會由紅變黃，而堿性條件下會變成紅紫色,。細(xì)菌污染常常會使培養(yǎng)基變成黃色,，真菌污染會使培養(yǎng)基變成深紫紅色。

注意：丟掉細(xì)胞以前要仔細(xì)檢查一下,，快速生長和生長過量的細(xì)胞培養(yǎng)基也會變黃,。當(dāng)培養(yǎng)箱中CO2的濃度變化時培養(yǎng)基的顏色也會變成黃色（CO2濃度太高）或是粉紅色（CO2 濃度太低）。

●聞,！當(dāng)然不能打開瓶子去聞,，把鼻子貼在瓶口聞，許多污染發(fā)生以后都會散發(fā)出易察覺的,、特殊的氣味,，甚至打開培養(yǎng)箱門就聞到了。

二、顯微觀察

在倒置顯微鏡下,，先用低倍（10x）再用高倍（40x）物鏡（總放大倍數(shù)為400）觀察細(xì)胞培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞：

●其他有機(jī)體：在低倍鏡下,，真菌的菌絲體成長棒狀，并橫穿整個視野,，還可以觀察到酵母,，有時呈小圓球形，有時還有芽,。

在高倍鏡下可以觀察到細(xì)菌,，它們可能是棒狀或球狀，單獨成鏈或成團(tuán)存在,，它們也可能和細(xì)胞混在一起,，并且明顯處于細(xì)胞內(nèi)部，有些細(xì)胞可能已經(jīng)裂解變得模糊,。觀察時可能每兩個視野才出現(xiàn)一個污染（當(dāng)然也算被污染了?。铱赡芪廴疚锸强梢赃\(yùn)動的,。

●損傷細(xì)胞：感染會殺死細(xì)胞,，可能導(dǎo)致每個細(xì)胞都裂解/細(xì)胞層從附著物上全剝離，更可能的是細(xì)胞變得不規(guī)則（或大或?。?，在低倍鏡下是黑色的粒狀。

（1）懸浮細(xì)胞

懸浮培養(yǎng)細(xì)胞比貼壁培養(yǎng)細(xì)胞更加難以顯微觀察,，尤其是高倍顯微鏡下,。

●將培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿放在顯微鏡的載物臺上，靜置一會,。將焦距對準(zhǔn)器皿的底部,，觀察那些輕微附著的細(xì)胞，因為它們可能已經(jīng)接觸到了微生物,。

●對準(zhǔn)整個培養(yǎng)瓶焦距,， 當(dāng)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的時候，用細(xì)聚焦調(diào)節(jié)旋鈕調(diào)節(jié),，仔細(xì)檢查周圍的培養(yǎng)基有沒有污染發(fā)生,。

（2）貼壁細(xì)胞

三、制片觀察法

如果你不能確定是否發(fā)生了污染

●制作濕涂片或染色片：取1 ml培養(yǎng)基離心,，用50μl培養(yǎng)基或緩沖液重新懸浮細(xì)胞,，滴一滴到載玻片，蓋上蓋玻片制成濕涂片,；或涂片,、固定并染色（甲基蘭或革蘭氏染液），在高倍鏡下觀察,。

●將細(xì)胞在營養(yǎng)培養(yǎng)基或血瓊脂培養(yǎng)基上劃線,，37℃培養(yǎng)3天。如果有菌落,，那么細(xì)胞被污染了,。

●取1 ml的細(xì)胞培養(yǎng)液至無菌的微量離心管中，37℃培養(yǎng)3天,。觀察到渾濁物,，做濕涂片顯微鏡觀察。

以上就是本期的內(nèi)容,，更多資訊,，歡迎點擊安培生物網(wǎng)站鏈接了解更多技術(shù)與產(chǎn)品資訊。

安培生物科技有限公司介紹：

安培生物堅持為生命科學(xué)研究,、活體動物轉(zhuǎn)染,、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細(xì)胞治療領(lǐng)域客戶,，提供*細(xì)胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑,；inviCELL™Platelet lysate無動物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn)，包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞和多種免疫細(xì)胞系等,，為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無血清細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務(wù),；提供以植物生物為平臺基因序列全人源化、*的細(xì)胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品,；提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL,、對細(xì)胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品,。安培生物專注為生物醫(yī)藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù),，努力發(fā)展為基因治療、細(xì)胞治療的生物科技企業(yè)