剛接種半小時左右剛貼壁時細胞呈圓形,，折光度很好,，鏡下觀察如小珍珠狀一個個地散落于培養(yǎng)皿中培養(yǎng)一段時間后一小片一小片的生長，片片不相連,。

特點：

RAW264.7細胞極其容易出現(xiàn)偽足（長角）,。需要及時觀察細胞，若出現(xiàn)偽足則提示該傳代了（可能是一天一傳）,。

當出現(xiàn)少量的偽足可正常傳代,，有少數(shù)分化的細胞是正常的，很難保證可以*不分化,。

分化的細胞：呈多角形,，明顯的體積變大，時常有較長的觸角,。

分化的RAW 264.7細胞

被胰酶消化過的RAW 264.7細胞表現(xiàn)出明顯的分化現(xiàn)象呈多角形,，有較長觸角。

解決辦法：刮取是比較合適的方法,。把細胞培養(yǎng)液倒掉,，加入37℃預溫的PBS，然后刮細胞,，食指和拇指夾緊細胞刮,，細胞刮橡膠頭刮面切面與平皿平行，用腕力輕輕刮（注意用腕力刮,，不要用臂力）,，切記只能刮一次，不要來回刮和反復刮,，吹打的力度一定要輕,，切勿暴力吹打。

更換血清批次后嚴重聚團的RAW 264.7

原因推斷：血清來源于動物,，其組成成分有1000種左右,，且血清組成及含量常隨供血動物的年齡、生理條件和營養(yǎng)條件而異,。每個批號的組分百分比含量都是不固定的,，所以批間差異是存在的。RAW 264.7細胞本身有聚團生長特性，但嚴重聚團可能受到血清里的某些因子刺激,。

解決辦法：先用血清試用裝,，試用效果好，可購買和血清試用裝批次相同的正裝,，囤積半年或一年的用量,，有效避免批間差對細胞的影響（胎牛血清在-20℃保存可達5年）。

個別分化的RAW 264.7細胞

培養(yǎng)時,，無法保證100% 不分化，通過傳代可以將分化比例控制在一定范圍,。RAW264.7細胞生長速度快，2-3天即可傳一代,， 傳代時間間隔超過3天很難吹下,，每一次接種密度都要控制好。

解決辦法：推薦傳代比例為1:3-1:6,；推薦傳代時間：2-3天,；推薦傳代融合率：80%-90%。

RAW 264.7細胞

生長良好的RAW264.7 胞體邊界感清晰,，各個喂得圓鼓鼓,、胖嘟嘟的，時刻準備著為人類生命科學研究而“獻身",。

最后為大家普及一條知識~

熱滅活可以滅活補體系統(tǒng)。啟動的補體參與溶解細胞事件,，刺激平滑肌收縮,，細胞和血小板釋放組胺，啟動淋巴細胞和巨噬細胞活化,。在免疫學研究中,，培養(yǎng)ES細胞、昆蟲細胞和平滑肌細胞時,，推薦使用熱滅活血清,。

熱滅活時請將血清置于 56℃水浴30分鐘。最好另加一個盛放與血清等體積水的燒杯并將溫度計插入水中,，以水中溫度56℃為計時開始時間,，加熱過程中不時輕輕旋轉混勻血清。

實驗顯示,，對大多數(shù)的細胞而言,，不需要使用熱滅活血清。經(jīng)此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進或*沒有作用，造成細胞生長速率降低,。同時沉淀物會顯著地增多,，這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察呈小黑點或絮狀物，影響細胞觀察,。若非必須,，不需要做熱滅活處理。