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細胞培養(yǎng)問題集錦第十七期,小編會繼續(xù)收集相關(guān)問題,,每期都為大家更新5個細胞培養(yǎng)中遇到的問題并解答~
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▲問:hepg2細胞有很多小球聚集到一起,,這是污染還是沒有吹開的細胞,?是不是念珠菌感染,?出不來形態(tài),吹不勻,。
答:肝癌就是這樣,,很容易坨,肝癌會有一個聚集成團,,一片一片的clone,,也會成聚集,推薦是帶丙酮酸鈉的MEM,。
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問:細胞培養(yǎng)中加入biotin有什么作用呢?
答:是為了促進細胞增殖,。
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▲問:細胞轉(zhuǎn)了敲低基因的病毒之后,為什么總會出現(xiàn)一些比細胞還要亮的,,碎片樣的東西,,或者圓形的東西呢,?
答:基因的表達包括 GFP用,,都會用泊松分布Poisson distribution的形式出現(xiàn), 有些細胞有多一點GFP的表達, 有些少的,。圓形的細胞是因為基因蛋白表達較高 ,,所以熒光蛋白表達都高,。
▲問:這種很亮的碎片呢?感覺他不像是細胞的樣子,!
答:細胞開始細胞凋亡,,可能是凋亡小體,可用DAPI,。
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問:細胞剛復蘇都是亮亮的圓點是什么原因?之前復蘇長得很快,。
答:是不是還沒貼壁,?
問:之前兩天都長滿貼壁了,這次也兩天了只有一點細胞貼壁,。
答:復蘇率不高,,是不是沒凍好?
問:之前別人凍的,,需要重新復蘇嗎,?
答:如果培養(yǎng)基和血清養(yǎng)別的沒問題,那不太可能是營養(yǎng)體系問題,??赡苁莾龃姝h(huán)節(jié)出現(xiàn)問題,傳代后不會有好轉(zhuǎn),,看看細胞能增殖出來不,,增殖不出來就需要重新復蘇了。
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▲問:請問上面三個圖里,,細胞是染菌了嗎?昨天給單獨加了100ul過濾的bi血清,。
答:從照片上看黑點的形態(tài)高倍數(shù)放大是球菌,,低倍數(shù)放大它們是立體聚集在一起,疑似是葡萄球菌,。平面聚集的是鏈球菌,。
問:黑點是不會動的,用三抗可以嗎,,還有救嗎,?
答:細胞還有庫存的話建議重新復蘇,因為細胞感染了,,去除要花多些時間,。
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