2. 用橡膠細(xì)胞刮子將細(xì)胞從培養(yǎng)皿上刮下來,，將其轉(zhuǎn)入一只1.5 ml 的微量離心管中,，置于冰浴5 min。

3. 在4℃以最大離心速度離心細(xì)狍1 min,，細(xì)胞沉淀重懸于100 μl 冰冷的0.25 mol/l 的pH7.5的Tris·Cl緩沖液中。

4. 在干冰/乙醇中凍結(jié)細(xì)胞5 min,，移至37℃融解5 min,。重復(fù)這種凍融過程兩次以上。

5. 在冰上冷卻細(xì)胞裂解液,，然后,，4℃以最大離心速度離心5 min。移出并保留上清（細(xì)胞提取物）,，置于- 20℃凍存,。

6. 在下面混合液中分析20 μl 細(xì)胞提取液

2 μl 200 μCi/ml ［14C］氯霉素
20 μl 4 mmol/l 乙酰輔酶A
32.5 μl 1 mol/l Tris·Cl，pH7.5
75.5 μl H2O

7. 對于每組分析,，在微量離心管中加130 μl 上述混含液和20 μl 提取液,，輕輕混勻。 37℃溫育1 h,。

8. 加1 ml 乙酸乙酯至反應(yīng)液中,，在漩渦混合器上混勻,。離心1 min，移出上層液相（乙酸乙酯）在Speedvac蒸發(fā)器中蒸干乙酸乙酯45 min,。

9. 薄層層析缸的平衡：在缸中加入190 ml 氯仿,，10 ml 甲醇，及一張與TLC薄層平板大小大致相等的Whatman 3MM 濾紙,，靜置2 h,。

10. 將毎個樣品重懸于30 μl 乙酸乙酯中，點(diǎn)樣,，在TLC薄板邊緣之上約2 cm 處,，每樣5 μl。

11. 在盛有200 ml 19：1氯仿/甲醇的平衡過的層析缸中展開色譜,，進(jìn)行2 h 或至溶劑的前沿接近薄板的頂部為止,。取下TLC薄板，在空氣中晾干,。用放射性墨水筆作上標(biāo)記后,，用塑料薄膜包裹，置于感光片上進(jìn)行放射自顯影,。

12. 切出各顯影點(diǎn)相應(yīng)的薄層塊放入閃爍液中計數(shù),，先測定出各單乙酰氯霉索的計數(shù)值所占的百分?jǐn)?shù)而計算提取物的活性，按下列公式計算的活性：

同實(shí)驗其他方法

原位裂解細(xì)胞的CAT分析法

1. 60 mm 培養(yǎng)皿中轉(zhuǎn)染了CAT表達(dá)質(zhì)粒的細(xì)胞,，用2 ml PBS洗1次,。每培養(yǎng)皿加入2 ml 低滲緩沖液，在室溫下溫育2~5 min,。 2. 吸去低滲緩沖液,，加入400 μl T

CAT活性的相-抽提分析法

一、來源于哺乳動物細(xì)胞 1. 按“CAT活性的層析分析法"中的步驟1~5的凍融法,，制備哺乳動物細(xì)胞提取物,。如果用胰蛋白酶消化或制細(xì)胞方法來收集細(xì)胞，則將原位裂解法的步驟1至4用以下的步驟2

人生長激素的放射免疫分析法

1. 取轉(zhuǎn)染了hGH表達(dá)質(zhì)粒的哺乳動物細(xì)胞的培養(yǎng)液100~500 μl,。 2. 加100 μl 培養(yǎng)液或標(biāo)準(zhǔn)品至12 mm×75 mm 圓底試管中,。加入100 μl 125I-

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安培生物堅持為生命科學(xué)研究、活體動物轉(zhuǎn)染,、大規(guī)模生物生產(chǎn),、基因和細(xì)胞治療領(lǐng)域客戶，提供*細(xì)胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑,；inviCELL™Platelet lysate無動物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn),，包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞和多種免疫細(xì)胞系等,，為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無血清細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務(wù)；提供以植物生物為平臺基因序列全人源化,、*的細(xì)胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品,；提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對細(xì)胞無毒性影響,、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品,。安培生物專注為生物醫(yī)藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)，努力發(fā)展為基因治療,、細(xì)胞治療的生物科技企業(yè),。

CAT活性的層析分析法

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