A. 對(duì)小鼠處以安樂后,，從背部剪下方形皮膚組織,，將該皮膚貼到干凈的濾紙上，用至少 20 倍體積的 4％多聚甲醛固定過夜（20 小時(shí),，＜ 24 小時(shí)）,。注意：把皮膚貼到濾紙上時(shí)，用鑷子輕輕把皮膚展開,，既不要留下皺褶,，也不要太用力拉扯而使組織結(jié)構(gòu)變形。

B. 將固定好的皮膚放入裝有蒸餾水的 50 ml 試管中進(jìn)行清洗,，清洗過程中可以將試管放于脫色搖床上,，用較低的速度輕輕搖動(dòng)約 30 分鐘。

C. 將清洗完畢的皮膚放入至少 20 倍皮膚體積的 30％的蔗糖溶液（溶于 PB）中,，放置于 4 ℃,，直到組織下沉到管底,。

D. 將鋁箔疊成小槽子，加入適量冷凍包埋劑,。將皮膚組織從蔗糖溶液中取出,，先用包埋劑包裹潤濕兩遍，以去掉原來的水相,，再把組織放入小槽子,，調(diào)整好方向。

E. 馬上小心地把小槽子的底部浸入預(yù)先準(zhǔn)備好的液氮中,，注意不要使組織的方向改變,。等包埋劑凝固后，把組織塊保存在 -20 ℃ 或 -80 ℃,。切片可用于油紅染色或免疫熒光,。

注意事項(xiàng)

1. 固定液的選擇應(yīng)該根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)要求確定。多聚甲醛是很常用的固定液,，適合進(jìn)行免疫組化,，免疫熒光等方面的實(shí)驗(yàn)；如果只是進(jìn)行形態(tài)的觀察（HE 染色）,，可以選用 Bouin 固定液,；如果要進(jìn)行電鏡分析的小體積樣品，則建議采用戊二醛進(jìn)行固定,。

2. 當(dāng)組織在蔗糖溶液中剛沉下時(shí),，即可包埋。

3. 包埋時(shí)要用細(xì)鑷子小心調(diào)整包埋方向,，以便今后切片能切到完整的毛囊,。

以上就是本期的內(nèi)容，更多資訊,，歡迎關(guān)注安培生物科技有限公司了解更多技術(shù)與產(chǎn)品資訊,。

安培生物科技有限公司介紹：

安培生物堅(jiān)持為生命科學(xué)研究、活體動(dòng)物轉(zhuǎn)染,、大規(guī)模生物生產(chǎn),、基因和細(xì)胞治療領(lǐng)域客戶，提供*細(xì)胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑,；inviCELL™Platelet lysate無動(dòng)物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn),，包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞和多種免疫細(xì)胞系等，為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無血清細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務(wù),；提供以植物生物為平臺(tái)基因序列全人源化,、*的細(xì)胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品；提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL,、對(duì)細(xì)胞無毒性影響,、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品,。安培生物專注為生物醫(yī)藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)，努力發(fā)展為基因治療,、細(xì)胞治療的生物科技企業(yè),。

小鼠皮膚冷凍包埋實(shí)驗(yàn)步驟

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