細(xì)胞培養(yǎng)是實(shí)驗(yàn)室里最常見和最基本的實(shí)驗(yàn)了,。您的細(xì)胞養(yǎng)的好嗎？您對細(xì)胞培養(yǎng)體系了解嗎,？培養(yǎng)基對細(xì)胞培養(yǎng)影響大嗎,？……

細(xì)胞培養(yǎng)，蘊(yùn)含著大學(xué)問,。有時(shí)候細(xì)胞狀態(tài)不好,，轉(zhuǎn)染 、藥篩這些實(shí)驗(yàn)根本就沒辦法做,。影響細(xì)胞培養(yǎng)的因素很多,，讓我們先從培養(yǎng)基和血清說起。

細(xì)胞培養(yǎng)基是人工模擬細(xì)胞在體內(nèi)生長的營養(yǎng)環(huán)境,，是提供細(xì)胞營養(yǎng)和促進(jìn)細(xì)胞生長增殖的物質(zhì)基礎(chǔ),。培養(yǎng)液或培養(yǎng)基的含義幾乎相同，英文都是medium,。當(dāng)它是粉劑時(shí),，傾向性地稱為培養(yǎng)基，而將粉劑配成液體后,，多稱為培養(yǎng)液。培養(yǎng)液中常常補(bǔ)加血清,、抗生素等成分,。培養(yǎng)基主要包括天然細(xì)胞培養(yǎng)基、合成細(xì)胞培養(yǎng)基和無血清細(xì)胞培養(yǎng)基等,。

經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種,，Invitrogen (GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone),、Sigma,、Procell（普諾賽）等公司都可以提供,。其中DMEM、RPMI 1640,、MEM,、DMEM/F12都是應(yīng)用*泛的培養(yǎng)基。其他如M199,、IMDM,、L15培養(yǎng)基等也用于某些細(xì)胞的培養(yǎng)。

以前經(jīng)常聽到有人問,，這種細(xì)胞該用哪一種培養(yǎng)基呢?其實(shí)這個(gè)問題的答案可以很簡單。此話怎講?如果這種細(xì)胞是購自ATCC或Procell的細(xì)胞庫,，那很簡單,，問供應(yīng)商就行了?；蛘哒业较嚓P(guān)的文獻(xiàn),，作為參考。

但如果你是著手建立一種全新細(xì)胞的培養(yǎng)體系，根本找不到任何參考,，那你就得花點(diǎn)時(shí)間自己試驗(yàn)了,。萬事開頭難嘛。因?yàn)闆]有一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)答案,。在MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞,，很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長?？傊?，首先選MEM做貼壁細(xì)胞培養(yǎng)、RPMI 1640做懸浮細(xì)胞培養(yǎng)會是一個(gè)好的開始,。你也可以購買幾種培養(yǎng)基來,，然后花大約兩周的時(shí)間做一個(gè)簡單的細(xì)胞生長實(shí)驗(yàn)，來選擇其中較為適合的,。有時(shí)候你會驚訝地發(fā)現(xiàn)你的最佳培養(yǎng)條件與文獻(xiàn)報(bào)道的不同,，就算是同一種培養(yǎng)條件，細(xì)胞的生長狀態(tài)也時(shí)好時(shí)壞,，這是很正常的,。因?yàn)樵噭⑺?、不同批號的血清之間都存在著差異,。要提高培養(yǎng)基的穩(wěn)定性，可以從培養(yǎng)基和血清兩方面入手,。

以前大部分實(shí)驗(yàn)室都是用干粉培養(yǎng)基,，但配制過程就較為繁瑣，要溶解,、調(diào)pH值,，過濾，過程中可能會產(chǎn)生一些濃度誤差,，而且有些實(shí)驗(yàn)室的水質(zhì)并不理想,，所以培養(yǎng)的效果會有差異。如果使用液體培養(yǎng)基,，這種人為的誤差會減少,，因?yàn)楫吘故谴笈抗I(yè)化生產(chǎn)的，批間差會很小,。比干粉培養(yǎng)基貴不了多少,，而且還幫你省了過濾器和時(shí)間。

血清含有生長因子可促進(jìn)細(xì)胞的繁殖,，含有附著因子可促進(jìn)細(xì)胞的貼壁，同時(shí)還具有抗胰酶活性。血清同時(shí)也是礦物質(zhì),、脂類及激素的來源,。較為常用的血清有小牛血清、新生牛血清,、胎牛血清和馬血清等,。牛血清是按照采血時(shí)間的早晚來分類的。采血時(shí)間越早,，營養(yǎng)物質(zhì)越豐富,，所含抗體也越少，因而胎牛血清適合要求高的細(xì)胞系和克隆化培養(yǎng),。由于瘋牛病的原因,，到目前為止，我國政府仍然禁止從北美洲,、歐洲和日本等地區(qū)進(jìn)口牛血清,，因此市面上的牛血清大多來自澳洲、南美洲,，或是國產(chǎn)的,。安培生物目前有代理ZETA LIFE系列澳洲、南美,、法國等地來源的進(jìn)口胎牛血清,。

而血清批次間的差別就是不可避免的,，這種差異來源于不同的制備方法和除菌方法、動物的年齡差別及血清的儲存條件等,，而且與取血動物的來源關(guān)系密切,。不同的牧場、不同的氣候天氣及其他環(huán)境因素都可能影響血清的質(zhì)量,。因此選好了一種血清就要盡可能長期使用它,。在需要更換時(shí)，也要盡量保持與原有的一批血清相似,。