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中級(jí)會(huì)員 | 第5年

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細(xì)胞培養(yǎng)試劑這樣用 ,,你都對(duì)了嗎?

時(shí)間:2021/11/2閱讀:1464
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01


為什么要在溶解的一周內(nèi)使用貯存在4℃冰箱中的液體胰蛋白酶溶液?

答:胰蛋白酶在4℃就可能開始降解,,如果在室溫下放置超過30分鐘,,就會(huì)變得不穩(wěn)定,但是胰酶在消化細(xì)胞前必須要預(yù)熱,,否則容易出現(xiàn)酶活力不夠,, 也會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞消化不下來,所以為了更好的培養(yǎng)細(xì)胞,,在細(xì)胞培養(yǎng)不多的時(shí)候可以分裝使用,,這樣就不會(huì)出現(xiàn)上面的兩種情況了,還有就是配制胰酶的時(shí)候一定要注意降低熱源哦,。


02

培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢的原因有哪些,?其解決辦法有哪些?

答:可能得原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清,;培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷氨酰胺或生長(zhǎng)因子等耗盡或缺乏或已被破壞,;培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng),;比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液組分,,比較新血清與舊血清支持細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)找到可能的原因。 

解決辦法:增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度,;讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液,;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補(bǔ)加谷氨酰胺或生長(zhǎng)因子等,;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),,如發(fā)現(xiàn)污染,丟棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌,;血清需保存在-5℃到-20℃,;培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清*培養(yǎng)液在2-8℃保存,,并在2 周內(nèi)用完,;分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體,。

03

如何消除組織培養(yǎng)的污染,?

答:當(dāng)重要的培養(yǎng)細(xì)胞污染時(shí),研究者可能試圖消除或控制污染,。首先,,確定污染物是細(xì)菌、真菌,、支原體或酵母,,把污染細(xì)胞與其它細(xì)胞系隔離開,,用實(shí)驗(yàn)室消毒劑消毒培養(yǎng)器皿和超凈臺(tái),,檢查HEPA過濾器。

高濃度的抗生素和抗霉菌素可能對(duì)一些細(xì)胞系有毒性,,因而,,做劑量反應(yīng)實(shí)驗(yàn)確定抗生素和抗霉菌素產(chǎn)生毒性的劑量水平。這點(diǎn)在使用抗生素和抗霉菌素如時(shí)尤其重要,。

要是支原體污染,,可以選擇我們的支原體抑制劑(啟達(dá)生物;貨號(hào):SD0034)來抑制支原體的生長(zhǎng),,它可使大部分的支原體清除干凈,,也可少量頑固的支原體。黑膠蟲污染也使目前實(shí)驗(yàn)室的一大問題,,黑膠蟲清除劑對(duì)藥物的量和要求都很高,,首先,使用的抗菌小分子純化度要高,,這樣可降低產(chǎn)品本身存在的內(nèi)毒素,,其次是加入的量,量少會(huì)清除不干凈黑膠蟲,,但是量多會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞的死亡,,可以直接選擇我們的黑膠蟲抑制劑(啟達(dá)生物;貨號(hào):SD0036) 1ml/支裝,,每100ml只需100ul即可,,關(guān)鍵是價(jià)格,優(yōu)惠到您不能想象 。



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