材料與儀器
C57BL／6J小鼠
Hank’s液 單克隆抗體 補體 伊紅-Y染液
眼科剪 眼科鑷 平皿 不銹鋼網 試管 吸量管 尖吸管 載玻片 蓋玻片 顯微鏡
實驗步驟
一,、實驗方法
1. 小鼠胸腺細胞懸液的制備：將4～6周齡小鼠采用頸椎脫臼法處死，取出胸腺放入已加入約4 ml冷Hank’s液的平皿中,，在100目的不銹鋼網上研磨后，過篩,，放入試管,，離心1 000 rpm，5分鐘,，用Hank’s液洗兩次,。將沉淀的細胞重懸于Hank’s液中，配成1×107/ml細胞懸液,。
2. 取試管3支,，標明順序，依據下表依次加入1×107/ml胸腺細胞懸液,、抗小鼠Thy-1的單克隆抗體(最適稀釋度)及Hank’s液,，放入37℃水浴30分鐘。
3. 取出后每管加入1%伊紅-Y染液1滴,，混勻,，室溫放置2分鐘。
4. 重新混勻后分別在一張載玻片上滴片,，加蓋玻片鏡檢,。先在低倍鏡下觀察，再用高倍鏡觀察,，比較3管中細胞死活情況,。
二、實驗結果
死細胞呈紅色,，無光澤且腫脹變大,；活細胞不著色,、有光澤且形態(tài)正常。
高倍鏡下計數200個細胞并計算其中死細胞的百分數,。計算公式如下：死細胞百分數= EQ EQ \F(實驗管死細胞數%-對照管死細胞數%,，100%-對照管死細胞數%)
