日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

深圳市安培生物科技有限公司
中級會員 | 第5年

19126518388

血清系列
細(xì)胞轉(zhuǎn)染
支原體清除
細(xì)胞凍存
實驗耗材
分子試劑
細(xì)胞增殖與凋亡
Biozellen系列
培養(yǎng)基
ELISA試劑盒
TOYOBO(東洋紡)
ZYMO RESEARCH
Greiner(格瑞納)
IKA(艾卡)
化學(xué)發(fā)光底物(ECL)
PROSPEC系列
Epigentek系列
微生物檢測
細(xì)胞生物學(xué)
Corning康寧
解離試劑
細(xì)胞類-實驗耗材
原代細(xì)胞
植物檢測系列試劑盒
SERANA
BSA
細(xì)胞系
生化試劑盒
環(huán)境檢測系列試劑盒(AKEN)
類器官培養(yǎng)
緩沖器和解決方案
生物三凝膠基質(zhì)
細(xì)胞因子分子
生物樣本庫
蛋白研究系列

細(xì)胞培養(yǎng)附著物知多少

時間:2021/10/20閱讀:2160
分享:


在實驗室中,,我們一般會用聚丙乙烯制成的無菌培養(yǎng)瓶,、培養(yǎng)皿或多孔板來培養(yǎng)細(xì)胞,。它們透光性好、生長面平滑,、能夠提供質(zhì)地均勻,、重復(fù)性好的單層培養(yǎng)物。然而由于是人工合成的,,因此聚丙乙烯是疏水性的,,表面不適宜細(xì)胞生長,故用于組織培養(yǎng)的塑料,,都要經(jīng)過γ射線照射,、化學(xué)處理或電離輻射,以產(chǎn)生親水的帶電表面,,使細(xì)胞能夠附著,。附著遇到的最大困難是如何讓細(xì)胞附著上去,而包被附著物有可能會促進(jìn)細(xì)胞的粘附,。

在很多時候,,為了適應(yīng)不同實驗的需求、解決細(xì)胞貼壁不牢的問題,,我們需要對培養(yǎng)器皿用不同的物質(zhì)進(jìn)行包被后使用,。這些物質(zhì)可以是膠原,、纖連蛋白或一些其他基質(zhì)產(chǎn)物,尤其在培養(yǎng)原代細(xì)胞及3D細(xì)胞培養(yǎng)中,,運用更為廣泛,。



1聚合物

科學(xué)家們發(fā)現(xiàn),在缺乏血清條件下,,克隆細(xì)胞必須以濃度為1mg/ml的多聚賴氨酸包被培養(yǎng)皿,,同樣的技術(shù)也可以促進(jìn)神經(jīng)突觸的生長。其中,,多聚-D-賴氨酸(PDL)異構(gòu)體優(yōu)于多聚-L-賴氨酸(PLL),,因為前者不容易被細(xì)胞外液蛋白酶水解,但目前兩者都在使用,。

Poly-L-lysine的中文名為多聚賴氨酸,簡稱PLL,,是通過鏈霉菌屬的細(xì)菌菌株自然發(fā)酵生產(chǎn)聚賴氨酸,。

貼壁依賴性細(xì)胞,通過包被帶正電的高分子多聚賴氨酸,,可以提高無血清或低血清培養(yǎng)環(huán)境下的細(xì)胞貼壁率,,加強培養(yǎng)器皿表面對血清蛋白和細(xì)胞外基質(zhì)蛋白的吸附,加快細(xì)胞的增殖,。

多聚賴氨酸(ScienCell,,貨號:0403/0413)包被多適用于神經(jīng)元細(xì)胞、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的培養(yǎng),,能夠促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞分化和神經(jīng)突的生長,。


2膠原和明膠

膠原(collagen)是哺乳動物體內(nèi)含量最多的一類蛋白質(zhì),廣泛存在于從低等脊椎動物的體表面到哺乳動物機體的一切組織中,。它是支持細(xì)胞和組織生長的重要胞外基質(zhì)蛋白,,其形成的胞外環(huán)境有利于多種細(xì)胞的粘附、生長,、遷移和分化,。用變性膠原處理后能改善多種細(xì)胞的附著能力,如上皮細(xì)胞,;而天然未變性的膠原可能是細(xì)胞分化功能表達(dá)所必需的,。

明膠是一種大分子非均質(zhì)親水膠體,是膠原部分水解后得到的水溶性蛋白多聚體,,明膠與膠原具有同源性,。實驗已經(jīng)發(fā)現(xiàn),包被明膠有利于肌肉細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng),。

明膠溶液(ScienCell,,貨號:0423)與多聚賴氨酸一樣,,也是一種粘附劑,涂覆在容器表面可以促進(jìn)細(xì)胞貼壁生長,。推薦用于培養(yǎng)分化的人類胚胎干細(xì)胞,、某些原代細(xì)胞和永生化細(xì)胞。

明膠因其具有較高的生物相容性,、生物可降解性且體內(nèi)降解后不產(chǎn)生其他副產(chǎn)物,、無免疫原性和血液相容性以及具有與膠原相同的組分和生物性質(zhì),也廣泛應(yīng)用于組織工程和藥物遞送系統(tǒng)中,。


3基質(zhì)成分

基質(zhì)成分包括層粘連蛋白,、纖連蛋白、玻連蛋白等,,其中許多是天然產(chǎn)物,,如果化學(xué)成分不*明確,則需要一定的純化,。當(dāng)然,,細(xì)胞外基質(zhì)中的許多成分都可以作為重組蛋白使用,因此成分明確,,可以純化,。

纖連蛋白(Fibronectin, FN),也稱為纖維連接蛋白,,是一種廣譜的,、天然的細(xì)胞粘附因子。它主要由肝臟及血管內(nèi)皮細(xì)胞生成,,廣泛存在于血漿,、多種細(xì)胞表面及細(xì)胞基質(zhì)中,一種高分子量的非膠原性糖蛋白,,分子含糖量4.5-9.5%可以與血纖蛋白,、肝素、膠原,、DNA以及細(xì)胞表面受體結(jié)合,,而且具有多種細(xì)胞生物學(xué)功能,廣泛參與細(xì)胞的遷移,、粘附,、增殖、止血及組織修復(fù)的過程,。

常用于細(xì)胞培養(yǎng)的纖連蛋白一般為牛血漿纖維粘連蛋白(ScienCell,,貨號:8248)或人纖連蛋白(ScienCell,貨號:8488;貨號:CSP044),。

纖連蛋白作為細(xì)胞培養(yǎng)的基質(zhì),,可提高多種細(xì)胞的貼壁率、匯合率,,縮短細(xì)胞匯合時間,,使細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)良好,代謝率增強,,DNA,、RNA及蛋白質(zhì)合成速度顯著提高;細(xì)胞的集落率升高,,原代培養(yǎng)成活率提高,。


4細(xì)胞外基質(zhì)

雖然表面有惰性包被已經(jīng)足夠了,但仍然有必要利用合適的單層細(xì)胞培養(yǎng)物為某些特殊細(xì)胞類型提供合適基質(zhì),。如用去污劑去除匯合的小鼠成纖維細(xì)胞(3T3),、人成纖維細(xì)胞(MRC-5)等的單層細(xì)胞后,殘留的細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)能促進(jìn)卵巢顆粒細(xì)胞的分化,、研究腫瘤細(xì)胞行為及血管形態(tài)發(fā)生,。


5飼養(yǎng)層

基質(zhì)覆蓋有助于細(xì)胞的附著、生長和分化,。但對于一些較難培養(yǎng)的細(xì)胞,尤其是低細(xì)胞密度下更難培養(yǎng)的細(xì)胞,,需要活細(xì)胞來維持,。原因可能是成纖維細(xì)胞的代謝物滲漏,或是成纖維細(xì)胞分泌生長因子對培養(yǎng)基的補充,,也可能由于細(xì)胞產(chǎn)物優(yōu)化了細(xì)胞的附著面,。生長成匯合單層細(xì)胞的飼養(yǎng)層可為其他細(xì)胞附著提供一個合適的甚至是選擇性的表面。例如,,單層神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞可以促進(jìn)中樞和外周神經(jīng)元的存活及生長,,雖然這種情況是由擴散因子而不是直接的細(xì)胞接觸引起的。

飼養(yǎng)層細(xì)胞大部分可用小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(MEF),,而飼養(yǎng)層細(xì)胞大都用于培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞,。


6非黏性附著物

當(dāng)然,有時我們不希望細(xì)胞附著生長,,例如培養(yǎng)非貼壁依賴性的細(xì)胞(懸浮細(xì)胞)時,,可通過將細(xì)胞接種到瓊脂中的方法來實現(xiàn),因為在這些基質(zhì)中未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞不易形成集落,。目前較為常用到的是瓊脂,、瓊脂糖或Methocel(甲基纖維素)。前兩種為凝膠,第三種為高粘度溶膠,。因為甲基纖維素是溶膠,,細(xì)胞可以在其中緩慢下沉,因此經(jīng)常在其下面放一層瓊脂,。在非組織培養(yǎng)基的器皿上不涂瓊脂層也能達(dá)到細(xì)胞培養(yǎng)的目的,,但有時會出現(xiàn)細(xì)胞附著和鋪展。




會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏,!
標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復(fù)您~
撥打電話
在線留言