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轉(zhuǎn)讓二手梯度PCR儀PCR技術(shù)是一種分子生物學(xué)技術(shù),，用于在幾個(gè)數(shù)量級(jí)上擴(kuò)展一段DNA的一個(gè)或幾個(gè)拷貝,，復(fù)制數(shù)千到數(shù)百萬(wàn)個(gè)DNA序列。作為一種廉價(jià)但可靠的方法，能夠重復(fù)復(fù)制DNA的聚焦片段,。ABI公司的PCR儀器在行業(yè)內(nèi)受到普遍的歡迎,。今天小編 Veriti 梯度PCR儀為例就為您簡(jiǎn)單介紹一下具體的操作方法。

轉(zhuǎn)讓二手梯度PCR儀步驟：

1,、打開PCR儀的熱蓋,，插入0.2ml的樣品管，蓋好熱蓋,；

2,、打開PCR儀的電源，儀器程序開始初始化,，需等待幾分鐘,；

3、初始化完成后,，顯示主菜單,；

4、點(diǎn)“Browse/New Methods",，進(jìn)入PCR程序列表,；

5、可以直接點(diǎn)一個(gè)PCR程序,，選擇“Start Run"運(yùn)行,；點(diǎn)右邊的符號(hào)，可以選擇不同的文件夾,。如要新建一個(gè)PCR程序,，點(diǎn)“New"，出現(xiàn)PCR程序,；

6,、添加一段程序：點(diǎn)中上方的“Stage"位置，該位置變紅,；再點(diǎn)“Add",，軟件將加入一段新的程序；

7,、修改循環(huán)數(shù),、溫度、時(shí)間：點(diǎn)中循環(huán)次數(shù),、溫度或時(shí)間位置,，下方出現(xiàn)數(shù)字鍵。依次點(diǎn)數(shù)字鍵,，出現(xiàn)合適數(shù)字后,，點(diǎn)“Done"確定；

8、增加一個(gè)步驟：點(diǎn)“Step"位置,，該位置變紅,；再點(diǎn)“Add"，軟件將加入一個(gè)新的步驟,；

9,、刪除一個(gè)步驟：點(diǎn)“Step"位置，在點(diǎn)“Delete",，軟件將該步驟刪除,；

10、建立梯度模式：點(diǎn)中一個(gè)步驟,，再點(diǎn)“Option"鍵,；

11、點(diǎn)“VeriFlex step",，出現(xiàn)梯度創(chuàng)建窗口,；

輸入6個(gè)梯度溫度，溫度下方的“1－2"是指對(duì)應(yīng)的1,、2兩行加熱孔，全部輸好后,，點(diǎn)“Done"確定,。注意：相鄰的兩個(gè)梯度溫度之差zui大不能超過(guò)5℃！

12,、建立漸變模式：

1）點(diǎn)中一個(gè)步驟,，再點(diǎn)“Option"鍵；

2）點(diǎn)“Auto Delta",，出現(xiàn)漸變模式創(chuàng)建窗口,；

點(diǎn)“Staring Cycle"，輸入起始循環(huán)數(shù),；點(diǎn)“Delta Temperature",，輸入溫度變化值；點(diǎn)“Delta Time",，輸入時(shí)間變化值,。漸變模式適用于touchdown PCR，可以提高PCR反應(yīng)的特異性,。例：輸入起始循環(huán)數(shù)為2,，溫度變化值為＋0.5℃，時(shí)間變化值為＋5s,，則表示從第2個(gè)循環(huán)開始,，每循環(huán)一次升溫0.5℃，時(shí)間增加5s。
13,、增加暫停步驟：

1）點(diǎn)中一個(gè)步驟,，再點(diǎn)“Option"鍵；

2）點(diǎn)“Pause",；

輸入暫停的起始位置,，暫停間隔和暫停時(shí)間，點(diǎn)“Done"確定,。上圖表示每隔10個(gè)循環(huán)暫停10s,，在10個(gè)循環(huán)的第1個(gè)循環(huán)之前暫停。

14,、編輯PCR程序完成后,，點(diǎn)“Save"保存;

點(diǎn)“Run Method"，輸入PCR程序名稱,；點(diǎn),，選擇保存PCR程序的文件夾（如果要保存在USB文件夾中，需要先插U盤）,。再輸入反應(yīng)體積和熱蓋溫度（這兩項(xiàng)在運(yùn)行程序時(shí)可以修改）,。點(diǎn)“SaveδExit"確定；
15,、回到PCR程序列表界面,，選擇新建的PCR程序；

16,、點(diǎn)“Start Run",，出現(xiàn)運(yùn)行參數(shù)設(shè)置窗口；

17,、儀器運(yùn)行選中的PCR程序,，顯示運(yùn)行監(jiān)視窗口；

18,、暫停運(yùn)行：
點(diǎn)“Pause Run",，儀器暫停，出現(xiàn)暫停選項(xiàng)欄,；

“Remaining Time"顯示暫停剩余時(shí)間,，“Elapse Time"顯示已暫停時(shí)間。
如果需要修改暫停時(shí)間,，點(diǎn),，輸入時(shí)間值，點(diǎn)“Done"確定,；點(diǎn)“Resume Run",，結(jié)束暫停,，繼續(xù)運(yùn)行PCR程序。
19,、終止運(yùn)行：點(diǎn)“Stop"可以終止整個(gè)PCR程序,；
20、反應(yīng)報(bào)告：
PCR程序結(jié)束后,，儀器會(huì)自動(dòng)生成反應(yīng)報(bào)告,，顯示當(dāng)次反應(yīng)的各項(xiàng)指數(shù)。該報(bào)告可以保存和打??；

21、PCR反應(yīng)結(jié)束后,，打開熱蓋,，取出樣品，關(guān)閉儀器電源,。并開蓋放置,，使熱蓋和加熱模塊正常降溫。