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l 細(xì)胞鑒定

STR鑒定已通過

l 細(xì)胞來源

國家資源庫

l 細(xì)胞背景

人白血病T淋巴細(xì)胞，Jurkat細(xì)胞由Schneider建立,，來源于一個14歲的男孩的外周血,。最初命名為 JM。該細(xì)胞系是從 Kendall Smith 博士從 Jurkat-FHCRC細(xì)胞株中獲得一個克隆,，不含支原體,。經(jīng)佛波酯(phorbol esters)和外源凝集素（lectins）或抗T3單克隆抗體（需要兩種物質(zhì)共同誘導(dǎo)）誘導(dǎo)后可產(chǎn)生大量IL-2。

l 細(xì)胞特性

1） 來源：T淋巴細(xì)胞,；急性T細(xì)胞白血病

2） 形態(tài)：淋巴母細(xì)胞,懸浮生長

3） 含量：>1x106 細(xì)胞數(shù)

4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途：僅供科研使用

l 培養(yǎng)條件：

1）準(zhǔn)備 1640基礎(chǔ)培養(yǎng)基          （awcell-0002）               87%

   優(yōu)質(zhì)胎牛血清                  （awcell-0500）              10%

   GlutaMAX-1谷氨酰胺            ( awcell-0900 )                 1%

   Sodium Pyruvate丙酮酸鈉        ( awcell-01100 )                1%

P/S青霉素-鏈霉素             （awcell-15140-122）           1%

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

l 注意事項：

參考傳代周期：

不超過300萬細(xì)胞/ mL,，建議將活細(xì)胞密度控制在10萬-100萬/ mL之間參考傳代密度：10萬活細(xì)胞/ mL,參考換液頻率：2-3天,。

注意：

a）該細(xì)胞為懸浮細(xì)胞，根據(jù)培養(yǎng)經(jīng)驗以及客戶的反饋,，傳代時使用【半換液法】對細(xì)胞狀態(tài)有利,，因此我?guī)旖ㄗh您使用【半換液法】進(jìn)行傳代。同時,，您在收到細(xì)胞后,，請不要通過離心的方式收集細(xì)胞，可以直接向培養(yǎng)瓶中添加等體積的新鮮培養(yǎng)液,，然后將細(xì)胞吹打均勻后移入兩個新的T25培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)即可,。

b）該細(xì)胞對血清質(zhì)量較為敏感，建議您使用進(jìn)口優(yōu)質(zhì)血清進(jìn)行培養(yǎng),，傳代時請注意保持細(xì)胞密度在合適的范圍,。

對于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

懸浮狀態(tài)下生長的細(xì)胞,，可以通過向培養(yǎng)瓶中添加*培養(yǎng)基來維持細(xì)胞的生長狀態(tài),，一般情況下細(xì)胞密度維持在1×105~1×106個/mL（不同細(xì)胞對密度要求不同,，）可以維持細(xì)胞的正常生長,。如需分瓶可以將細(xì)胞懸液收集到離心管中1000rpm,，離心5min,，棄去上清,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后重懸混勻后將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中,，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的*培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力,，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3） 細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實驗使用,。

l 運輸形式：

低溫：（1）1mL凍存管包裝干冰運輸,，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈,、凍存管瓶蓋脫落,、破損及細(xì)胞有污染，請立即與我們聯(lián)系,。

常溫（2） T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

l 生物安全

1. 所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,，并請注意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄,。

2. 建議在復(fù)蘇凍存細(xì)胞時始終使用防護(hù)手套,、衣服和戴上防護(hù)面罩,。注意：凍存管浸沒在液氮中會泄漏，并會慢慢充滿液氮,。解凍時,，液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導(dǎo)致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子，從而產(chǎn)生飛揚的碎屑造成人員傷害,。