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l 細胞鑒定

STR鑒定已通過

l 細胞來源

國家資源庫

l 細胞背景

該細胞是由Lozzio從一名53歲的慢性髓細胞性白血病急變期的女性患者的胸水中分離建立的,。該細胞曾被認為來源于粒系,，處于高度未分化階段,；Anderson等人作了細胞膜特性的研究后，認為該細胞是紅白血病細胞系,。該細胞是對自然殺傷細胞高度敏感的體外靶標(biāo),，故而被廣泛應(yīng)用于這方面的研究。K562的原始細胞是一種具有多向分化潛能的造血系統(tǒng)的惡性腫瘤細胞,，能自發(fā)分化為紅系,、粒系和單核系的可辨識的祖細胞。該細胞表達CD7（25％）,。

l 細胞特性

l 培養(yǎng)條件：

1） 準(zhǔn)備IMDM（推薦awcell-0008）培養(yǎng)基,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%,；雙抗,，1%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

l 注意事項：

對于懸浮細胞,，傳代可參考以下方法：

懸浮狀態(tài)下生長的細胞,，可以通過向培養(yǎng)瓶中添加*培養(yǎng)基來維持細胞的生長狀態(tài)，一般情況下細胞密度維持在1×105~1×106個/mL（不同細胞對密度要求不同,，）可以維持細胞的正常生長,。如需分瓶可以將細胞懸液收集到離心管中1000rpm，離心5min,，棄去上清,，補加1-2mL培養(yǎng)液后重懸混勻后將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的*培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行,。

3） 細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。

l 運輸形式：

低溫：（1）1mL凍存管包裝干冰運輸,，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈,、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,，請立即與我們聯(lián)系,。

常溫（2） T25瓶復(fù)蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作,。

l 生物安全

1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,，并請注意防護,，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

2. 建議在復(fù)蘇凍存細胞時始終使用防護手套,、衣服和戴上防護面罩,。注意：凍存管浸沒在液氮中會泄漏，并會慢慢充滿液氮,。解凍時,，液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導(dǎo)致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子，從而產(chǎn)生飛揚的碎屑造成人員傷害,。