小鼠原代星形膠質細胞詳述:
星形膠質細胞,,是膠質細胞中體積最大的一種,。從胞體發(fā)出許多長而分支的突起,,伸展充填在神經細胞的胞體及其突起之間,,起支持和分隔神經細胞的作用。
纖維性星形膠質細胞多分布在腦脊髓的皮質,,突起細長,,分支較少,胞質中含,,多分布在灰質,,細胞突起粗短,分支多,。胞質內膠質絲較少,,又稱苔狀細胞。電鏡下星形膠質細胞的胞核有缺失,,胞質較清亮,,游離核糖核蛋白體和粗面內質網(wǎng)均很少,糖原顆粒豐富,,有大量的膠質絲,。纖維形星形膠質細胞的突起呈長圓柱形,而原漿性星形膠質細胞的突起呈薄片狀,,并常包裹著神經細胞及其突觸,。星形膠質細胞的腳板與血管內皮細胞之間相隔一層基板,腳板質膜與基板接觸處有半橋粒結構,。
神經科學研究中的重要模型,,它們在中樞神經系統(tǒng)中扮演著多種角色,,包括支持和維護神經元生存、供能以及調節(jié)神經元活動等,。星形膠質細胞可以根據(jù)其形態(tài)和功能被分為原生質型和纖維型兩種亞型,。它們表達特定的標記物,如膠質纖維酸性蛋白(GFAP),,這是成熟星形膠質細胞的一個標志,。
在實驗室中,研究人員可以通過特定的培養(yǎng)技術從新生小鼠的腦組織中分離和培養(yǎng)星形膠質細胞,。這些細胞在體外培養(yǎng)時會展現(xiàn)出典型的星形形態(tài),,并且可以通過免疫熒光染色等技術進行鑒定。例如,,可以使用抗GFAP抗體來標記星形膠質細胞,,而其他標記物如S100-β和谷氨酸轉運蛋白(EAAT1)也可以用來確認細胞的身份。
在進行原代培養(yǎng)時,,研究人員通常會選擇新生24小時內的小鼠,,因為這時候的腦組織更容易被解離成單細胞。通過物理方法將腦組織分散成單細胞后,,可以在含有DMEM/F12培養(yǎng)基,、胎牛血清(FBS)和胰蛋白酶等的培養(yǎng)條件下進行培養(yǎng)。在培養(yǎng)過程中,,星形膠質細胞會逐漸從其他類型的細胞中分離出來,,并在培養(yǎng)皿中形成單層。
小鼠原代星形膠質細胞特性:
1)組織來源于實驗動物的正常腦組織,。
2)細胞鑒定:神經膠質纖維酸性蛋白(GFAP)免疫熒光染色法,。
3)經鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1,、 HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:星狀細胞,,貼壁培養(yǎng),。
運輸形式:
低溫:(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈,、凍存管瓶蓋脫落,、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系,。
常溫: (2) T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,,收到后按照細胞接收后的處理方法操作,。
生物安全:
1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,,并請注意防護,,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
2. 建議在復蘇凍存細胞時始終使用防護手套,、衣服和戴上防護面罩,。
注意:凍存管浸沒在液氮中會泄漏,并會慢慢充滿液氮,。解凍時,,液氮轉化成氣相可能導致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子,從而產生飛揚的碎屑造成人員傷害,。