目錄:上海安為生物科技有限公司>>細胞系/細胞株>>人源細胞系>> MC3T3-E1小鼠胚胎成骨細胞
| 應用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
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小鼠胚胎成骨細胞MC3T3-E1 種屬鑒定
MC3T3-E1是一種小鼠胚胎成骨細胞前體細胞，源自C57BL/6品系的胚胎小鼠顱骨。這種細胞具有分化成為成骨細胞和骨細胞的能力,，并能在體外形成鈣化的骨組織。MC3T3-E1細胞系有多個亞克隆株，是研究成骨細胞分化、骨細胞生物學,、骨代謝和骨肉瘤等疾病的理想材料，尤其適合研究胞外基質(zhì)（ECM）信號通路的作用,。細胞形態(tài)呈成纖維細胞樣,，貼壁生長，培養(yǎng)條件為5%CO2和37℃,，常用培養(yǎng)液配方為MEMα培養(yǎng)基含核苷和GlutaMAX添加劑,，添加10%胎牛血清FBS。傳代周期約為3-4天,，傳代比例通常為1:3,，換液頻率為每2-3天一次。MC3T3-E1細胞在科研中廣泛應用,，用于骨質(zhì)疏松癥,、骨肉瘤,、牙齒發(fā)育和骨組織工程等領(lǐng)域的研究,。細胞檢測結(jié)果顯示，MC3T3-E1不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等污染。
| 小鼠胚胎成骨細胞MC3T3-E1 | |
| l 細胞鑒定 | 種屬鑒定已通過 |
| l 細胞來源 | 國家資源庫 |
| l 細胞背景 | 從胚胎/胎兒 C57BL/6 小鼠的顱骨建立,；文獻中描述的分化為成骨細胞并產(chǎn)生膠原蛋白,。該細胞有多個亞克隆，可以作為體外研究成骨細胞分化的良好模型,。 |
| l 培養(yǎng)條件： | 1） 準備MEMα（推薦awcell-0003）培養(yǎng)基,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%,；雙抗,，1%,。 2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。 |
| l 注意事項：
| 對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法： 1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。 2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間）,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10?S的培養(yǎng)基來終止消化。 3.輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心3-5min,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中,，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的*培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行,。 3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用,。 |
| l 運輸形式： | 低溫：（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復蘇,，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈,、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,，請立即與我們聯(lián)系,。 常溫（2） T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作,。 |
| l 生物安全 | 1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護,，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄,。 2. 建議在復蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩。注意：凍存管浸沒在液氮中會泄漏,，并會慢慢充滿液氮,。解凍時，液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子,，從而產(chǎn)生飛揚的碎屑造成人員傷害,。 |
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