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參考價(jià)	面議

細(xì)胞系/細(xì)胞株

鼠源細(xì)胞系

人源細(xì)胞系

應(yīng)用領(lǐng)域	醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)

大鼠心肌細(xì)胞H9C2源于BD1X大鼠胚胎心臟組織的克隆細(xì)胞株亞克隆了H9c2（2-1）細(xì)胞株,，它表現(xiàn)許多骨骼肌的特性。這個(gè)細(xì)胞株中的成肌細(xì)胞能融合形成多核的肌管,，并對(duì)乙酰膽堿的刺激發(fā)生反應(yīng),。如果培養(yǎng)基中的血清濃度下降到1%,，融合發(fā)生得很快,。

詳細(xì)介紹

大鼠心肌細(xì)胞H9C2
l 細(xì)胞鑒定	種屬鑒定已通過(guò)
l 細(xì)胞來(lái)源	國(guó)家資源庫(kù)
l 細(xì)胞背景	B. Kimes and B. Brandt從源于BD1X大鼠胚胎心臟組織的克隆細(xì)胞株亞克隆了H9c2(2-1)細(xì)胞株，它表現(xiàn)許多骨骼肌的特性,。這個(gè)細(xì)胞株中的成肌細(xì)胞能融合形成多核的肌管,，并對(duì)乙酰膽堿的刺激發(fā)生反應(yīng)。如果培養(yǎng)基中的血清濃度下降到1%,，融合發(fā)生得很快,。
l 細(xì)胞特性	1）來(lái)源：心臟 2）形態(tài)：成肌細(xì)胞，貼壁生長(zhǎng) 3）含量：>1x106 細(xì)胞數(shù) 4）規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝 5) 用途：僅供科研使用,。
l 培養(yǎng)條件：	1）準(zhǔn)備DMEM （含1.5g/L NaHCO3推薦：awcell-128-0001）或(GIBCO,貨號(hào)12800017,，添加NaHCO3 1.5g/L)培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%,；雙抗1%。 2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
l 注意事項(xiàng)：	注意: 大鼠心肌細(xì)胞H9C2該細(xì)胞在DMEM(含1.5g/LNaHCO3)培養(yǎng)基中生長(zhǎng)良好,，大部分品牌的DMEM含有較高濃度的NaHCO3（3.7g/L）,，若使用DMEM（3.7g/L NaHCO3）培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)需要提高CO2濃度（7%-10%）。對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法： 1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。 2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL,，T75瓶2-3mL）,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10?S的培養(yǎng)基來(lái)終止消化,。 3.輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的*培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力,，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行,。 3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用,。
l 運(yùn)輸形式：	低溫：（1）1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸，收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈,、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,，請(qǐng)立即與我們聯(lián)系,。常溫（2） T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作,。
l 生物安全：	1. 所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù),，所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄,。 2. 建議在復(fù)蘇凍存細(xì)胞時(shí)始終使用防護(hù)手套、衣服和戴上防護(hù)面罩,。注意：凍存管浸沒(méi)在液氮中會(huì)泄漏,，并會(huì)慢慢充滿液氮,。解凍時(shí),，液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導(dǎo)致容器爆炸或用危險(xiǎn)力吹掉其蓋子，從而產(chǎn)生飛揚(yáng)的碎屑造成人員傷害,。

大鼠心肌細(xì)胞H9C2是一種從大鼠胚胎心臟組織中分離并克隆出來(lái)的細(xì)胞系,，具有骨骼肌的許多特性。這些細(xì)胞能夠融合形成多核的肌管,，并對(duì)乙酰膽堿的刺激產(chǎn)生反應(yīng),。當(dāng)培養(yǎng)基中的血清濃度降低到1%時(shí)，細(xì)胞融合會(huì)加快,。H9C2細(xì)胞在心血管疾病的研究中非常有用,，因?yàn)樗鼈兛梢阅M心肌細(xì)胞的某些特性和行為。
H9C2細(xì)胞的形態(tài)為成肌細(xì)胞樣,，貼壁生長(zhǎng),，并且在培養(yǎng)時(shí)需要特定的條件，如使用DMEM培養(yǎng)基,，添加10%的胎牛血清,，以及在37攝氏度、5%CO2的條件下培養(yǎng),。傳代周期通常為2-3天,，傳代比例為1:3-1:5。凍存液的配方通常是95%培養(yǎng)基加上5%的DMSO,。