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l 細(xì)胞鑒定                 

種屬鑒定已通過(guò)                    

l 細(xì)胞背景                 

此細(xì)胞株源自Abelson鼠科白血病病毒誘導(dǎo)的腫瘤,。此細(xì)胞株不分泌可檢測(cè)到的病毒顆粒,，XC斑點(diǎn)形成試驗(yàn)陰性?？梢园嬛行约t并吞噬乳膠顆粒與酵母聚糖,。可以抗體依賴性地分解綿羊紅血球與腫瘤靶細(xì)胞,。LPS或PPD處理2天可誘導(dǎo)分解紅血球但對(duì)腫瘤靶細(xì)胞無(wú)作用,。                                        

l 細(xì)胞特性                    

1） 來(lái)源：鼠科白血病病毒誘導(dǎo)的腫瘤；單核細(xì)胞,；巨噬細(xì)胞,。      

2） 形態(tài)：不規(guī)則圓形，紡錘狀,，貼壁細(xì)胞,，少量懸浮。                    

3） 含量：>1x106  細(xì)胞數(shù),。                    

4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝,。                    

5） 用途：僅供科研使用。                    

l 培養(yǎng)條件                    

1） 準(zhǔn)備DMEM(包含2mM L-谷氨酰胺,，0.11g / L丙酮酸鈉) (推薦awcell-0001)培養(yǎng)基,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清10 %；P/S青霉素-鏈霉素 1%,。                    

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。                    

l 注意事項(xiàng)                    

注意事項(xiàng)：                    

（a）在細(xì)胞生長(zhǎng)的初始階段,，細(xì)胞以貼壁的形式生長(zhǎng)并呈現(xiàn)出長(zhǎng)方體的形態(tài)和有“偽足”延伸。隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加,，細(xì)胞呈現(xiàn)圓形并以疊加的形式生長(zhǎng),。細(xì)胞密度達(dá)到一定的程度，會(huì)有細(xì)胞以懸浮的方式散落到到培養(yǎng)基中,，鏡下觀察會(huì)發(fā)現(xiàn)懸浮和貼壁的細(xì)胞會(huì)同時(shí)出現(xiàn),。                    

（b）該細(xì)胞傳代時(shí)不需要用胰酶消化。傳代時(shí)，用無(wú)菌細(xì)胞刮刮拭培養(yǎng)表面將細(xì)胞刮落,，收集離心后重懸接種到新的培養(yǎng)瓶中,。                    

（c）該細(xì)胞形態(tài)上包含松散貼壁的紡錘形和圓形或者立方形。當(dāng)細(xì)胞密度較大時(shí),，細(xì)胞會(huì)輕微脫落變圓或者許多細(xì)胞堆積在一起,，有些細(xì)胞甚至脫落漂浮。這些漂浮的細(xì)胞是存活的,，在傳代時(shí)應(yīng)收集起來(lái),，離心后細(xì)胞沉淀可以繼續(xù)培養(yǎng)。

（d）血清質(zhì)量差異可能引起細(xì)胞貼壁能力變化,，應(yīng)選用高質(zhì)量的胎牛血清,。                    

該細(xì)胞為懸浮和輕微的貼壁細(xì)胞，傳代可以參考以下方法：                    

該細(xì)胞用細(xì)胞刮鏟替代胰酶來(lái)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行處理,。用無(wú)菌細(xì)胞刮鏟刮拭細(xì)胞附著培養(yǎng)表面將細(xì)胞刮落,，收集細(xì)胞后離心去上清，重懸后接種到新的裝有新鮮培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),。收貨后第一次傳代1:2進(jìn)行,，后續(xù)可以根據(jù)實(shí)際的情況以1:2~1:4的比例進(jìn)行傳代。                    

3） 細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用,。                    

l 運(yùn)輸形式                    

低溫:（1）1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸,，收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈,、凍存管瓶蓋脫落,、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)系,。                    

常溫: （2） T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。                    

l 生物安全                    

1. 所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù),，所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄,。                    

2. 建議在復(fù)蘇凍存細(xì)胞時(shí)始終使用防護(hù)手套、衣服和戴上防護(hù)面罩,。注意：凍存管浸沒(méi)在液氮中會(huì)泄漏,，并會(huì)慢慢充滿液氮。解凍時(shí),，液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導(dǎo)致容器爆炸或用危險(xiǎn)力吹掉其蓋子,，從而產(chǎn)生飛揚(yáng)的碎屑造成人員傷害。