目錄:上海安為生物科技有限公司>>細胞系/細胞株>>人源細胞系>> MLE12小鼠肺上皮細胞 MLE-12
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
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MLE-12 小鼠肺上皮細胞
MLE-12【MLE12】 | |
l 細胞鑒定 | 種屬鑒定已通過 |
l 細胞來源 | 國家資源庫 |
l 細胞特性
| 1） 來源：小鼠正常肺組織 2） 形態(tài)：上皮細胞樣，貼壁生長 3） 含量：>1x106 細胞數(shù) 4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝 5) 用途：僅供科研使用,。 |
l 培養(yǎng)條件： | 1） 準備DMEM/F12基礎(chǔ)培養(yǎng)基 (awcell-0005) 94% 優(yōu)質(zhì)胎牛血清 （awcell-0500） 2% GlutaMAX-1谷氨酰胺 ( awcell-0900 ) 1% HEPES 1M Buffer solution (awcell-01200) 1% P/S青霉素-鏈霉素 （awcell-15140-122） 1% ITS（胰島素+轉(zhuǎn)鐵蛋白+硒） (awcell-4507) 1% hydrocortisone （awcell-8450） 10nM 雌二醇 (awcell-8140） 10nM 2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。 |
l 注意事項：
| 該細胞為輕微貼壁細胞,，傳代可以參考以下方法： 1. 收集：將培養(yǎng)瓶中的懸浮的細胞收集到離心管中。用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。由于細胞貼壁不牢PBS潤洗后細胞會脫落所以PBS也要回收到離心管中。 2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL,，T75瓶2-3mL）置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間）,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化,。 3. 將收集到的懸浮細胞、pbs清洗液中的細胞和消化下來的貼壁細胞以1000rpml離心5min,，棄去上清，補加1-2mL培養(yǎng)液后重懸混勻后將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中,，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的*培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。 3） 細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用,。 |
l 運輸形式： | 低溫：（1）1mL凍存管包裝干冰運輸,，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈,、凍存管瓶蓋脫落,、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系,。 常溫（2） T25瓶復(fù)蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。 |
l 生物安全 | 1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,，并請注意防護,，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。 2. 建議在復(fù)蘇凍存細胞時始終使用防護手套,、衣服和戴上防護面罩,。注意：凍存管浸沒在液氮中會泄漏，并會慢慢充滿液氮,。解凍時,，液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導(dǎo)致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子，從而產(chǎn)生飛揚的碎屑造成人員傷害,。 |
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