目錄:上海安為生物科技有限公司>>細胞系/細胞株>>人源細胞系>> HTERT-HPNE人胰腺導管細胞 hTERT-HPNE
| 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
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hTERT-HPNE 人胰腺導管細胞
hTERT-HPNE | |
l 細胞鑒定 | STR鑒定已通過 |
l 細胞來源 | 國家資源庫 |
l 細胞背景 | hTERT- hpne細胞系是通過逆轉(zhuǎn)錄病毒表達載體(逆轉(zhuǎn)錄病毒表達載體pBABEpuro)轉(zhuǎn)導人胰管產(chǎn)生的,，該載體含有hTERT基因,。受感染的細胞端粒酶呈陽性，但未衰老,，在Ref的文獻中傳代150多次后仍在增殖,。 |
l 細胞特性
| 1） 來源：人胰腺 2） 形態(tài)：上皮樣 貼壁生長 3） 含量：>1x106 細胞數(shù) 4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝 5) 用途：僅供科研使用。 |
l 培養(yǎng)條件： | 1）準備DMEM(無糖) （awcell-138-0001） 70.5% Medium M3 ( M300F-500) 23.5% 優(yōu)質(zhì)胎牛血清 5 % 重組人表皮生長因子EGF (awcell-C0298 ) 10ng/ml 嘌呤霉素 （awcell-8230） 750 ng/ml D-葡萄糖 ( awcell-8150 ) 2.5g/L P/S青霉素-鏈霉素 1% 2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。 |
l 注意事項：
| 1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。 2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間）,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。 3.輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的*培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行,。 3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。 4）運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞,，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞,。 收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。 |
l 運輸形式： | 低溫：（1）1mL凍存管包裝干冰運輸,，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復蘇,，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落,、破損及細胞有污染,，請立即與我們聯(lián)系。 常溫（2） T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,，收到后按照細胞接收后的處理方法操作,。 |
l 生物安全 | 1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,，并請注意防護,，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。 2. 建議在復蘇凍存細胞時始終使用防護手套,、衣服和戴上防護面罩,。注意：凍存管浸沒在液氮中會泄漏，并會慢慢充滿液氮,。解凍時,，液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子,，從而產(chǎn)生飛揚的碎屑造成人員傷害。 |
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