目錄:上海安為生物科技有限公司>>細胞系/細胞株>>人源細胞系>> CHME-3人小膠質(zhì)細胞 HMC3
應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
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HMC3 人小膠質(zhì)細胞
【HMC-3; CHME-3】 | |
l 細胞鑒定 | STR鑒定已通過 |
l 細胞來源 | 國家資源庫 |
l 細胞背景 | HMC3細胞系通過人類胎兒腦源性初級小膠質(zhì)細胞培養(yǎng)物的SV40依賴性永生建立。 HMC3 細胞對小膠質(zhì)細胞/巨噬細胞標記物 IBA1 呈強陽性,,對內(nèi)毒素受體 CD14 呈陽性,,但對星形膠質(zhì)細胞標記物 GFAP 呈陰性?;罨∧z質(zhì)細胞的標記物,,即 MHCII、CD68 和 CD11b 在靜息 HMC3 細胞中呈陰性,,但在被 IFN-γ(10 ng/ml,,24 小時)激活后上調(diào)。 |
l 細胞特性
| 1) 來源:人,;腦,;小膠質(zhì) 2) 形態(tài):巨噬細胞樣,貼壁生長 3) 含量:>1x106 細胞數(shù) 4) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝 5)用途:僅供科研使用,。 |
l 培養(yǎng)條件: | 1) 準備MEM培養(yǎng)基,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,;雙抗,,1%。 2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。 |
l 注意事項:
| 對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法: 1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。 2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。 3.輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心3-5min,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的*培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行,。 3)細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用,。 |
l 運輸形式: | 低溫:(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復蘇,,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈,、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,,請立即與我們聯(lián)系,。 常溫(2) T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作,。 |
l 生物安全: | 1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護,,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄,。 2. 建議在復蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩,。注意:凍存管浸沒在液氮中會泄漏,,并會慢慢充滿液氮。解凍時,,液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子,,從而產(chǎn)生飛揚的碎屑造成人員傷害。 |