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l 細(xì)胞鑒定

STR鑒定已通過

l 細(xì)胞來源

國(guó)家資源庫

l 細(xì)胞背景

該細(xì)胞來源于一名15歲的白人少年的肝癌組織,。形態(tài)為上皮形,，模式染色體數(shù)為55，在免疫抑制小鼠中不致瘤,。該細(xì)胞表達(dá)甲胎蛋白,、白蛋白、α-2-巨球蛋白,、α-1-抗胰蛋白酶,、轉(zhuǎn)鐵蛋白、α-1-抗凝乳蛋白酶,、結(jié)合珠蛋白,、銅藍(lán)蛋白、纖溶酶原,、補(bǔ)體C4,、C3激活物、纖維蛋白原,、α-1酸性糖蛋白,、α-2-HS-糖蛋白、β-脂蛋白,、視黃醇結(jié)合蛋白,；表達(dá)胰島素受體和胰島素樣生長(zhǎng)因子IGFⅡ的受體；該細(xì)胞具有3-羥基-3-甲酰輔酶A還原酶和肝甘油三酯脂肪酶的活性,。目前尚未證明該細(xì)胞中有HBV基因組,。

l 細(xì)胞特性

1.來源：肝細(xì)胞癌

2.形態(tài)：上皮細(xì)胞樣，貼壁生長(zhǎng)

3.含量：>1x106  細(xì)胞數(shù)

4.規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5.用途：僅供科研使用,。

l 培養(yǎng)條件：

1）準(zhǔn)備MEM（推薦AWCell-0012）培養(yǎng)基,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%,；雙抗,，1%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

l 注意事項(xiàng)：

1. hepg2細(xì)胞復(fù)蘇或傳代后會(huì)有少部分的細(xì)胞貼壁和部分懸浮的細(xì)胞,，復(fù)蘇兩天后細(xì)胞會(huì)從貼壁細(xì)胞向外開始生長(zhǎng),，有時(shí)細(xì)胞在生長(zhǎng)過程中,，細(xì)胞會(huì)在貼壁細(xì)胞的上方生長(zhǎng)，形成不同的細(xì)胞層,，這種情況會(huì)有發(fā)生,。 在細(xì)胞復(fù)蘇的一周內(nèi)，培養(yǎng)瓶中 通常會(huì)有懸浮的活的細(xì)胞團(tuán),，在換液過程中不要丟棄在這些活的懸浮細(xì)胞,，可以通過離心（125×g）回收細(xì)胞，重新打回到培養(yǎng)瓶中,，分離或者丟棄漂浮的活細(xì)胞會(huì)使細(xì)胞數(shù)量變少,，引起細(xì)胞的停滯生長(zhǎng)或細(xì)胞死亡。

2.培養(yǎng)條件的細(xì)微變化,，尤其是pH和培養(yǎng)基中血清的質(zhì)量,，可能會(huì)影響細(xì)胞的生長(zhǎng)狀況，在細(xì)胞的生長(zhǎng)過程中會(huì)有細(xì)胞內(nèi)的液泡出現(xiàn),，特別在細(xì)胞快要融合是會(huì)出現(xiàn)這種情況,。培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)使用未被滅活的高質(zhì)量、低內(nèi)毒素的胎牛血清,，可以使細(xì)胞更好的貼壁和形成單層細(xì)胞,。

3. 細(xì)胞在生長(zhǎng)過程中可以通過將血清濃度提到到20%來改善細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢的情況。（參考atcc 有關(guān)該細(xì)胞的描述）

l 運(yùn)輸形式：

低溫：（1）1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸,，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈,、凍存管瓶蓋脫落,、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)系,。

常溫（2） T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。

l 生物安全:

 1. 所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄,。

2. 建議在復(fù)蘇凍存細(xì)胞時(shí)始終使用防護(hù)手套,、衣服和戴上防護(hù)面罩。注意：凍存管浸沒在液氮中會(huì)泄漏,，并會(huì)慢慢充滿液氮,。解凍時(shí)，液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導(dǎo)致容器爆炸或用危險(xiǎn)力吹掉其蓋子,，從而產(chǎn)生飛揚(yáng)的碎屑造成人員傷害,。