目錄:上海安為生物科技有限公司>>細胞系/細胞株>>人源細胞系>> Beta TC 6小鼠胰島素瘤胰島β細胞 Beta-TC-6
| 應用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
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Beta-TC-6 小鼠胰島素瘤胰島β細胞
Beta-TC-6【Beta TC 6】 | |
l 細胞鑒定 | 種屬鑒定已通過 |
l 細胞來源 | 國家資源庫 |
l 細胞背景 | 這株細胞來源于轉(zhuǎn)基因小鼠中生長的一個胰腺腫瘤(胰島素瘤),。 這種小鼠攜帶了大鼠胰島素II基因啟動子調(diào)控的SV40早期基因的假基因結(jié)構(gòu)。 細胞包含豐富的胰島素和小量的胰高血糖素及生長抑素,。響應葡萄糖而分泌胰島素[PubMed:7533732],。 |
l 細胞特性
| 1） 來源：胰島素瘤 2） 形態(tài)：上皮細胞樣，貼壁生長,，少量懸浮,。 3） 含量：>1x106 細胞數(shù) 4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝 5） 用途：僅供科研使用。 |
l 培養(yǎng)條件： | 1） 準備DMEM(含1.5g/L NaHCO3,，推薦：awcell-128-0001或者(GIBCO,貨號12800017,，添加NaHCO3 1.5g/L) ）培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，15%,；雙抗1%。 2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 |
l 注意事項：
| 注意事項： 1. Beta-TC-6細胞生長緩慢,，這些細胞從冷凍保存中恢復需要幾天的時間,。開始時通常具有少量可存活的漂浮細胞，其最終會形成簇并粘附在培養(yǎng)瓶底部,，它們成簇地連接并形成堆積細胞的島嶼,。細胞不會*融合，培養(yǎng)物上會粘附可存活的漂浮細胞,，可通過溫和離心保留,。在添加細胞前，培養(yǎng)基至少要提前15-30分鐘平衡溫度和PH。 2. 該細胞在DMEM(含1.5g/LNaHCO3)培養(yǎng)基中生長良好,，大部分品牌的DMEM含有較高濃度的NaHCO3（3.7g/L）,，若使用DMEM（3.7g/L NaHCO3）培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞時需要提高CO2濃度（7%-10%）。 該細胞為懸浮和輕微的貼壁細胞,，傳代可以參考以下方法： 1. 收集：將培養(yǎng)瓶中的懸浮的細胞收集到離心管中,。用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。由于細胞貼壁不牢PBS潤洗后細胞會脫落所以PBS也要回收到離心管中,。 2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間）,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化,。 3. 將收集到的懸浮細胞,、pbs清洗液中的細胞和消化下來的貼壁細胞以1000rpml離心5min，棄去上清,，補加1-2mL培養(yǎng)液后重懸混勻后將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中,，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的*培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行,。 3） 細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用,。 |
l 運輸形式： | 低溫：（1）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復蘇,，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落,、破損及細胞有污染,，請立即與我們聯(lián)系。 常溫（2） T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,，收到后按照細胞接收后的處理方法操作,。 |
l 生物安全: | 1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,，并請注意防護,，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。 2. 建議在復蘇凍存細胞時始終使用防護手套,、衣服和戴上防護面罩,。注意：凍存管浸沒在液氮中會泄漏，并會慢慢充滿液氮,。解凍時,，液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子，從而產(chǎn)生飛揚的碎屑造成人員傷害。 |
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