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l 細胞鑒定

STR鑒定已通過

l 細胞來源

國家資源庫

l 細胞背景

1976 年從一名 75 歲男性急性淋巴細胞白血病 (ALL) 診斷時的外周血中建立,。

l 細胞特性

1） 來源：B淋巴細胞,；

2） 形態(tài)：淋巴細胞,懸浮生長

3） 含量：>1x106 細胞數(shù)

4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5) 用途：僅供科研使用,。

l 培養(yǎng)條件：

1）準備 1640基礎(chǔ)培養(yǎng)基（awcell-0002）優(yōu)質(zhì)胎牛血清 10%,   P/S 1%,。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

l 注意事項：

對于懸浮細胞,，傳代可參考以下方法：

懸浮狀態(tài)下生長的細胞,，可以通過向培養(yǎng)瓶中添加*培養(yǎng)基來維持細胞的生長狀態(tài)，一般情況下細胞密度維持在1×105~1×106個/mL（不同細胞對密度要求不同,，）可以維持細胞的正常生長,。如需分瓶可以將細胞懸液收集到離心管中1000rpm，離心5min,，棄去上清,，補加1-2mL培養(yǎng)液后重懸混勻后將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的*培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行,。

3） 細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。

l 運輸形式：

低溫：（1）1mL凍存管包裝干冰運輸,，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復蘇,，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落,、破損及細胞有污染,，請立即與我們聯(lián)系。

常溫（2） T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,，收到后按照細胞接收后的處理方法操作,。

l 生物安全:

1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,，并請注意防護,，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

2. 建議在復蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩,。注意：凍存管浸沒在液氮中會泄漏,，并會慢慢充滿液氮。解凍時,，液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子,，從而產(chǎn)生飛揚的碎屑造成人員傷害。