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脫氧雪腐鐮刀菌烯醇又稱嘔吐毒素,，由禾谷鐮刀菌產(chǎn)生，常出現(xiàn)在玉米(穗腐病),、小麥和大麥(赤霉病)上,。我國谷物中DON的標(biāo)準(zhǔn)為1.0mg/kg。
本試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測大米,、小米,、面等谷物及飼料樣本中的嘔吐毒素(Deoxynivalenol，DON)，試劑盒由預(yù)包被偶聯(lián)抗原的酶標(biāo)板,、辣根酶標(biāo)記物,、抗體、標(biāo)準(zhǔn)品及其他配套試劑組成,。檢測時,，加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本溶液，樣本中的嘔吐毒素和酶標(biāo)板上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競爭抗嘔吐毒素抗體,，加入酶標(biāo)記物后,，用TMB底物顯色，樣本吸光度值與其所含嘔吐毒素含量成負(fù)相關(guān),，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出樣本中嘔吐毒素的殘留量,。
酶聯(lián)免疫試驗步驟：
將所需試劑從4℃冷藏環(huán)境中取出，置于室溫平衡30min以上,，洗滌液冷藏時可能會有結(jié)晶需恢復(fù)到室溫以充分溶解,，每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數(shù)量的微孔板及框架,，將不用的微孔板放入自封袋,，保存于2-8℃
1、編號：將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)微孔按序編號,，每個樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行,，并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置
2、加樣反應(yīng)：加標(biāo)準(zhǔn)品或樣本50µl/孔到各自的微孔中,，然后加酶標(biāo)記物50µl/孔,，再加入50µl/孔的抗體工作液，用蓋板膜封板,，輕輕振蕩5秒混勻,，25℃反應(yīng)30分鐘
3、洗滌：小心揭開蓋板膜,，甩去孔內(nèi)液體,，每孔加350µl工作洗滌液，靜置30秒后棄去,，重復(fù)洗滌5次,，最后一次拍干(用吸水紙拍干，拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破)
4,、顯色：每孔加入底物液A50µl,，再加底物液B50µl，輕輕振蕩5秒混勻,，25℃避光顯色15分鐘(若藍(lán)色過淺,，可適當(dāng)延長反應(yīng)時間)
5,、終止：每孔加入終止液50µl，輕輕振蕩混勻,，終止反應(yīng)
6,、測吸光值：用酶標(biāo)儀于450nm處測定每孔吸光度值(建議用雙波長450/630nm)。測定應(yīng)在終止反應(yīng)后10分鐘內(nèi)完成
