胰蛋白酶(Trypsin)是一種絲氨酸水解酶,,它能把多肽鏈中賴(lài)氨酸和精氨酸殘基中的羧基側(cè)切段,水解細(xì)胞間的蛋白質(zhì),,破壞細(xì)胞間的連接,,從而使組織或貼壁細(xì)胞離散成單個(gè)細(xì)胞。胰酶分散細(xì)胞的活性與組織或細(xì)胞的特性,、胰酶濃度,、溫度和作用時(shí)間有關(guān),在pH 8.0和37℃時(shí),,胰酶的作用能力最-強(qiáng),,因此使用胰酶時(shí),,應(yīng)把握好濃度、溫度和時(shí)間,,以免消化過(guò)度造成細(xì)胞損傷,。
一般常用胰酶的工作濃度為0.25%,而半貼壁細(xì)胞或?qū)σ让该舾械募?xì)胞常采用低濃度(0.05%)的胰酶進(jìn)行細(xì)胞消化,。由于EDTA能夠螯合Ca2+和Mg2+,,從而破壞細(xì)胞連接促進(jìn)細(xì)胞的解離,因此在胰酶溶液中常常會(huì)加入一定量的EDTA混合使用,,以增強(qiáng)解離效果,。
胰蛋白酶溶液產(chǎn)品信息
形態(tài) | 液體 |
規(guī)格 | 125mL/500mL |
溶劑 | D-Hank's |
胰蛋白酶濃度 | 2.5 g/L |
EDTA•2Na | 0.2 g/L |
酚紅指示劑 | 10 mg/L |
儲(chǔ)存條件 | -5~-20℃ |
運(yùn)輸條件 | 低溫 |
有效期 | 12個(gè)月 |
胰蛋白酶溶液注意事項(xiàng)
1、由于不同的組織或者細(xì)胞對(duì)胰酶的作用反應(yīng)不一樣,,因此操作人員應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況,,確定最佳消化時(shí)間;消化細(xì)胞時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),,否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)狀況,;
2、使用普諾賽胰蛋白酶溶液時(shí)應(yīng)注意無(wú)菌操作,,避免污染,;
3、不宜長(zhǎng)時(shí)間放置于室溫環(huán)境或2-8℃長(zhǎng)期保存,;
4,、2-8℃中解凍,搖勻后使用,,切忌反復(fù)凍融,,用量較少時(shí)建議分裝凍存。
5,、由于D-Hank's平衡鹽溶液NaHCO3含量較低(0.35g/L),,因此該型胰蛋白酶溶液不能用于5% CO2的環(huán)境,若放入CO2培養(yǎng)箱,,溶液將迅速變酸,,使用時(shí)應(yīng)注意;
6,、普諾賽胰蛋白酶溶液中含有酚紅且采用干冰運(yùn)輸,因此在運(yùn)輸過(guò)程中包裝內(nèi)會(huì)有部分二氧化碳累積,,這些二氧化碳可能會(huì)進(jìn)入到溶液中導(dǎo)致PH略微下降,,從而導(dǎo)致溶液顏色由粉紅色變成橙色。該種橙色的溶液依然可以使用或者也可以采用無(wú)菌的2 M氫氧化-鈉溶液對(duì)PH進(jìn)行微調(diào)后使用,;
7,、普諾賽胰蛋白酶溶液僅用于科研或進(jìn)一步研究使用,,不用于診斷和治療。
胰蛋白酶溶液常見(jiàn)問(wèn)題
Q:胰蛋白酶溶液在4度大概能放多久,?
A:通常普諾賽建議胰蛋白酶放置在4℃冰箱內(nèi)一周內(nèi)使用完畢為宜,,如果您的使用量較少,可以將胰蛋白酶混勻后按需進(jìn)行分裝,,用不完的放在-5~-20℃冰箱長(zhǎng)期保存,。
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期刊:Materials Today Bio
DOI:10.1016/j.mtbio.2025.101578
影響因子 :8.7
引用產(chǎn)品: MEM 培養(yǎng)基 , 特級(jí)胎牛血清 , 青霉素-鏈霉素溶液(雙抗),100× , 0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA,,溶于PBS)
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期刊:INTERNATIONAL JOURNAL OF BIOLOGICAL MACROMOLECULES
DOI:10.1016/j.ijbiomac.2025.140819
影響因子 :7.7
引用產(chǎn)品: 青霉素-鏈霉素溶液(雙抗),,100× , 0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA,溶于PBS)
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