細(xì)胞培養(yǎng)過程中,，培養(yǎng)基的顏色變化往往對(duì)應(yīng)著細(xì)胞狀態(tài),。大多數(shù)情況下，我們所見的培養(yǎng)基都呈紅色,，這是因?yàn)榧?xì)胞培養(yǎng)基的PH值大多在7.4左右,，添加了酚紅的培養(yǎng)基的顏色就是紅色。不同成分培養(yǎng)基的顏色會(huì)有差異,，例如DMEM會(huì)比1640顏色深一點(diǎn),，主要是DMEM里面的酚紅含量比1640多導(dǎo)致,。當(dāng)然還有部分培養(yǎng)基不含有酚紅，呈現(xiàn)的就是無色或者淡黃色,。
圖1：DMEM培養(yǎng)基正常顏色
很多時(shí)候,，培養(yǎng)基顏色并不是我們所見的紅色，而是偏紫或偏黃,，不同顏色培養(yǎng)基究竟對(duì)應(yīng)何種細(xì)胞狀態(tài)呢,？本期細(xì)胞學(xué)堂將為您揭曉培養(yǎng)基顏色變化的原因。
培養(yǎng)基顏色偏紅或者紫
圖2：使用了一段時(shí)間后的培養(yǎng)基顏色偏深
開封了一段時(shí)間后的培養(yǎng)基,，顏色會(huì)比正常深很多,，如上圖。主要是因?yàn)榇蟛糠旨?xì)胞培養(yǎng)基所用的緩沖體系為NaHCO3,，培養(yǎng)基開封后NaHCO3會(huì)分解成CO2溢出,，導(dǎo)致培養(yǎng)基偏堿；可以將培養(yǎng)瓶擰松放置于CO2培養(yǎng)箱中一段時(shí)間后,，培養(yǎng)基顏色會(huì)變正常,。
顏色變深的培養(yǎng)基能不能繼續(xù)使用？
部分細(xì)胞能夠很快適應(yīng)培養(yǎng)基的這種PH值波動(dòng),，放入培養(yǎng)箱后可以正常生長,；也有極少數(shù)的細(xì)胞會(huì)比較敏感，造成細(xì)胞漂浮過多等情況,，如BV2細(xì)胞會(huì)就比較敏感,，可能出現(xiàn)漂浮增多的情況。
Tips：建議配好完-全培養(yǎng)基后,，分裝到50mL離心管,，并于一周內(nèi)用完，量少時(shí)放到15mL離心管里保存,。
培養(yǎng)基顏色變黃
通常培養(yǎng)基里的酚紅指示劑遇酸會(huì)變黃,，但也有可能是細(xì)胞被污染而導(dǎo)致的培養(yǎng)基顏色變黃，以下為幾種常見情況：
由于細(xì)胞代謝產(chǎn)酸,，培養(yǎng)了細(xì)胞后的培養(yǎng)基會(huì)從紅變黃,，如果培養(yǎng)基是橘黃色，則是細(xì)胞健康生長的顏色,，無須擔(dān)心,，繼續(xù)培養(yǎng)即可。
圖3：培養(yǎng)細(xì)胞后的培養(yǎng)基顏色
若細(xì)胞狀態(tài)良好,，但換液后培養(yǎng)基顏色變黃快,，則可能是因?yàn)榧?xì)胞密度大或消耗過大，提示需要傳代了。
圖4：培養(yǎng)基快消耗完時(shí)的顏色
若細(xì)胞狀態(tài)差,，生長異常,，培養(yǎng)基很快變黃，變渾濁,，鏡下觀察有較多小顆粒物,，則有可能是細(xì)菌污染（如圖5）或支原體污染。輕度污染可用抗生素清洗處理或使用支原體清除試劑,，重度污染建議消殺后丟棄,。
圖5：細(xì)菌污染時(shí)培養(yǎng)基顏色
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