小鼠單核巨噬細胞是機體重要的免疫細胞,,具有抗感染、抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)等重要作用,。①抗感染:非特異性吞噬殺傷多種病原微生物,,是機體非特異性免疫防御中的重要細胞。②提呈抗原,、啟動免疫應(yīng)答:在特異性免疫應(yīng)答中,,絕大多數(shù)TD抗原(胸腺依賴抗原)都需經(jīng)巨噬細胞吞噬和加工處理,并與其表面的MHC分子形成抗原肽-MHC復(fù)合物,,表達在細胞膜表面,,提呈給T細胞。巨噬細胞表面有很多黏附分子,,可與T細胞表面的協(xié)同刺激分子受體結(jié)合,,產(chǎn)生協(xié)同刺激信號,誘導(dǎo)T細胞的活化,,啟動免疫應(yīng)答,。③抗腫瘤:巨噬細胞被某些細胞因子如IFN-γ激活后能有效地殺傷腫瘤細胞,是參與免疫監(jiān)視的重要效應(yīng)細胞,。④免疫調(diào)節(jié):在特異性免疫應(yīng)答中,,巨噬細胞可分泌釋放多種細胞因子,參與免疫調(diào)節(jié),。

小鼠單核巨噬細胞具有較廣泛的造血活性,,可刺激中性粒細胞、單核細胞和巨噬細胞的增殖,、分化和功能活性,。主要用于腫瘤化療或放療引起的粒細胞減少。用于異體或自體骨髓移植,,加速骨髓功能恢復(fù),亦用于骨髓異常增生綜合征,。
小鼠單核巨噬細胞的培養(yǎng)環(huán)境與一般貼壁細胞并無差異,。即培養(yǎng)箱溫度為37℃,,CO2濃度為5%。推薦的培養(yǎng)基為DMEM+10%的胎牛血清,;實際上,,經(jīng)研究者們實驗發(fā)現(xiàn)高糖型DMEM培養(yǎng)的RAW264.7細胞傳代后貼壁更快、細胞生長速度更快,。因此,,推薦使用高糖型DMEM,F(xiàn)BS濃度為10%,,作為RAW264.7細胞的培養(yǎng)基,。
關(guān)于RAW264.7細胞的傳代方法,ATCC推薦使用細胞刮刀,。也可采用0.25%的胰酶消化或采用彎嘴吸管吹打等方法,。采用細胞刮刀進行傳代時,細胞能較大限度被收集起來,,但會對細胞造成機械性損傷,、影響細胞形態(tài)及貼壁時間等。采用胰酶消化時,,由于RAW264.7細胞貼壁較牢,,消化時間就較長。但消化時間點不易把握,,易消化過度,,對細胞生長造成抑制。
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