雞卵泡顆粒細胞是卵巢的主要功能細胞,,它們的增殖和分化直接影響卵巢功能活動,,如卵泡的生長起始、發(fā)育,、排卵,、黃體形成和類固醇激素的分泌,,細胞呈圓形或橢圓形。細胞總數(shù)約5×105個/瓶,,細胞純度高達80%以上,,不含HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌,。
從雞卵泡組織中分離出雞卵泡顆粒細胞;成熟卵泡是卵巢的結(jié)構(gòu)成分之一,。卵泡腔大,卵丘明顯,。卵泡的子宮內(nèi)膜細胞靠近卵泡的顆粒層,,它們之間有基底膜。子宮內(nèi)膜細胞呈多角形,,胞質(zhì)清晰,,核圓形。細胞間可見許多毛細血管,。外膜細胞位于最外層,,多呈梭形,與周圍結(jié)締組織無明顯界限,。卵泡內(nèi)的卵母細胞周圍有一層菱形或扁平細胞,。當卵泡開始發(fā)育,卵細胞生長時,,周圍的菱形細胞變成立方體,,由單層長成多層。由于其細胞質(zhì)中有顆粒,,故稱為顆粒細胞,。初級卵泡的顆粒細胞為單層;次級濾泡的顆粒細胞增加至多層,;成熟卵泡的顆粒細胞膨脹并成為單層,。顆粒細胞核大而圓,顏色深,。細胞的自由表面有許多細長的突起延伸到輻射區(qū)的凹陷處,。

收到雞卵泡顆粒細胞后,檢查外包裝是否完整,,細胞培養(yǎng)瓶是否完好,。并執(zhí)行以下操作:
1,、用1.75%酒精棉球擦拭T25細胞培養(yǎng)瓶外部。
2,、將細胞放入37度培養(yǎng)箱中,,并在處理前預熱3-4小時,以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。
3,、預熱*培養(yǎng)基(包括1%雙抗體)。
4,、顯微鏡下觀察細胞生長情況,,對不同倍數(shù)(40×、100×,、200×各1個)的細胞進行拍照,。
5、如果細胞密度小,,無菌操作,,除去培養(yǎng)基。向每瓶中加入5-6ml步驟4中制備的培養(yǎng)基,。將其放入37度的培養(yǎng)箱中,。當細胞密度達到80%以上時,傳代培養(yǎng),。如果細胞密度大,,達到80%以上,則進行傳代培養(yǎng),。
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