默克密理博Amicon Ultra-15超濾管  UFC900396

使用注意事項

（1）選擇合適的超濾管,。通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3,，比如目的蛋白分子量為35kDa，就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管,。若目的蛋白分子量為10kD左右,，則可以用截留分子量3kD的超濾管。認(rèn)真閱讀使用說明書,，注意超濾膜對各種化學(xué)物質(zhì)的耐受程度有所不同,。
（2）新買來的超濾是干燥的，使用前加入超純水,，水量*過膜,，冰浴或冰箱里預(yù)冷幾分鐘。然后將水倒出,，即可加入蛋白液，加入的多少,，以不超過管頂?shù)陌拙€為準(zhǔn),。操作要輕，加入蛋白液前,，超濾管需要插在冰上預(yù)冷,。
（3）平衡。質(zhì)量和重心二者都要達(dá)到平衡,。注意轉(zhuǎn)速和加速度不可太快,，否則直接損壞超濾膜,。開始離心超濾（離心機(jī)預(yù)冷至4度）。不同離心機(jī)的轉(zhuǎn)速 rpm換算成g之后,，有所不同,。離心機(jī)的加速度調(diào)至zui低檔，減小對膜的壓力,。注意,，一定要等離心機(jī)達(dá)到目的轉(zhuǎn)速之后，方可離開離心機(jī),，否則離心機(jī)出問題時,，無法*時間處理。膜與轉(zhuǎn)軸的方向根據(jù)說明書調(diào)整（角轉(zhuǎn)離心機(jī)的情況是膜與軸垂直）,。在實際使用中,，一般轉(zhuǎn)速開的比說明書里的要低，這樣可以延長離心管的使用壽命,。
（4）當(dāng)濃縮到剩下1ml時,，取50ul緩沖溶液，加入10ul流穿,，看有沒變藍(lán)色,，以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了,，將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾,。要精確判斷是否漏管，用5mgml的BSA離心10min,，再取流穿,，跑蛋白膠或Bradford粗測，繼續(xù)加入剩下的蛋白液濃縮（在冰上操作,，防止蛋白受熱）,，直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發(fā)生蛋白沉淀,，導(dǎo)致堵管,。若發(fā)生沉淀，要確定沉淀的具體原因,，是蛋白濃度過高還是Buffer不合適,；前者可用多根超濾管同時超濾，降低濃度的辦法解決,，后者的方法是換不同的緩沖溶液,，直到蛋白不發(fā)生沉淀為止。
（5）前面幾步用以濃縮蛋白，如果要換Buffer,，在總蛋白液濃縮至1ml左右的時候,，輕輕加入新的Buffer（經(jīng)0.22um超濾膜超濾），再 濃縮至1ml左右,，連續(xù)三次,，zui后一次的濃縮終體積根據(jù)需要的蛋白濃度而定，一般不多于500ul,，也有濃縮至200ul以內(nèi)的情況,。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算，三次達(dá)到1000倍以上,，基本上可以達(dá)到換buffer的目的,。

 應(yīng)用
濃縮含有抗原、抗體,、酶,、核酸（單株或雙株DNA/RNA樣本）、微生物,、洗出液和凈化樣本
的生物樣本
凈化組織培養(yǎng)基提取液和細(xì)胞溶解液中的大分子成分,，從反應(yīng)混合液中去除引物、連接或
分子標(biāo)記,，在HPLC之前去除蛋白質(zhì)
除鹽,、更換緩沖液或滲濾

所提供的材料
Amicon? Ultra-4裝置包括一個蓋子、一個過濾器和一個離心管,。

所需設(shè)備
帶有擺桶式或定角式轉(zhuǎn)子的離心器以及可以容納17 mm × 124 mm 15 mL錐底試管的
樣本腔/試管座
注意： 為了避免在離心過程中損壞裝置,，在旋轉(zhuǎn)前請檢查間隙。
帶有200微升（μL）*的移液管,，用于濃縮液回收

適用性
為確保對預(yù)定用途的適用性,，建議進(jìn)行初步的回收和截留試驗。 請參見“如何量化回收"
部分,。

裝置儲存與保質(zhì)期
儲存在15–30 °C下,。保質(zhì)期自生產(chǎn)之日起3年。密理博3KD超濾管UFC900396

Amicon Ultra系列離心超濾管,，可用于生物樣品純化,、蛋白質(zhì)濃縮、脫鹽和緩沖液更換,，垂直結(jié)構(gòu)的膜減少了濃差極化,，快速離心并可直接吸取回收樣本，濃縮倍數(shù)高達(dá)80-100 倍,，是樣本處理的得力助手。
超濾管分為0.5ml、4ml,、15ml三種上樣體積,，并有3kd、10kd,、30kd,、50kd、100kd五種截留分子量,。
默克密理博Amicon Ultra-15超濾管  UFC900396

產(chǎn)品訂購信息：
Amicon Ultra-0.5系列（貨號：UFC500396,、UFC501096、UFC503096,、UFC505096,、UFC510096）
Amicon Ultra-4系列（貨號：UFC800396、UFC801096,、UFC803096,、UFC805096、UFC810096）
Amicon Ultra-15系列（貨號：UFC900396,、UFC901096,、UFC903096、UFC905096,、UFC910096）