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在上篇文章中介紹了什么是組織包埋以及各種包埋劑的挑選和使用,接下來帶領(lǐng)大家了解特殊包埋方法以及如何使石蠟包埋取得最佳效果,。
我們正常的病理標(biāo)本采用石蠟包埋都可以獲得較為滿意的切片,,但有些標(biāo)本需要特殊方法才能制作,用普通的包埋方法達(dá)不到要求,,比如需要加急的標(biāo)本,、又比如體液標(biāo)本,這樣的標(biāo)本就需要有特殊的包埋方法,。
01 快速石蠟包埋法
主要應(yīng)用于加急標(biāo)本的快速診斷,,且組織塊太小或太碎,無法采用冰凍切片方法制片時(shí),,取材要薄,。將薄小的組織塊投入40%甲醛10ml,、95%乙醇85ml、冰cu酸5ml的混合固定兼脫水液中2分鐘,,入純丙酮Ⅰ3分鐘,,入純丙酮Ⅱ3分鐘,入苯2分鐘,,浸蠟5分鐘,,快速包埋組織后進(jìn)行冷卻切片、烤片,、脫蠟至水,、染色及封固。
02 體液石蠟包埋法
對于體液標(biāo)本,,如痰液,、胃液、尿液,、腹水和胸水等,,作病理切片檢查時(shí),也可用石蠟進(jìn)行包埋,。
如果是痰液,,應(yīng)選取痰中含有血液的部分或可疑的實(shí)體部分,包在雙層紗布內(nèi),,先以10%中性甲醛固定,,再經(jīng)脫水、透明和浸蠟,,最后包埋,。濁的液體放入離心管中,以2000~3000次/分鐘轉(zhuǎn)速進(jìn)行離心沉淀15秒,。
凡是新鮮胃液,、尿液、腹水和胸水等液體標(biāo)本,,應(yīng)先倒去上面的澄清液體,,將下面較為混濁的液體放入離心管中,以2000~3000次/分鐘轉(zhuǎn)速進(jìn)行離心沉淀5~10分鐘,。再倒去上清液,,并以10%甲醛固定下面的沉淀物,然后進(jìn)行脫水,、透明,、浸蠟和包埋。
如何使石蠟包埋取得最佳效果
我們可以做一些提高石蠟包埋效果的工作,以人為的力量改善石蠟的韌性和黏度:這種方法是在石蠟中加入一些其他物質(zhì),。
01 蜂蠟
蜂蠟,,又叫黃蠟,,是蜜蜂用來造巢的淡黃色蠟,,蜂蠟的熔點(diǎn)在54℃左右,質(zhì)地柔軟,,滑潤有韌性,。為了使低熔點(diǎn)的石蠟硬一些,可加入10%~20%的蜂蠟,。它能增加蠟的熔點(diǎn)而不必使組織浸在高溫內(nèi),,便于切片。同時(shí)也要根據(jù)組織的種類而異,,一般常規(guī)用量不超過5%為度,。
一般我們?nèi)缜兄?~5μm的切片,56~58℃的石蠟基本達(dá)標(biāo),,但如果要切制1~3μm的切片,,其韌性和黏度就顯不夠,就會出現(xiàn)石蠟無法支撐的現(xiàn)象,,因?yàn)楣庥杏捕鹊氖灂艽?,容易斷裂,如果加入蜂蠟,,使其韌性和黏度加強(qiáng),,就可以制出更好的切片。
02 硬脂酸
如果想加強(qiáng)石蠟的硬度,,可以加入硬脂酸,、松香等。硬脂酸為有光澤的白色片狀結(jié)晶體,,不溶于水,,而溶于乙醇,醚和氯fang,。熔點(diǎn)64~71℃,,在蠟中加入少量的硬脂酸可增加石蠟的滲透性。
03 松香
為棕黃色半透明的固體,,質(zhì)硬而脆,,遇熱熔解,呈膠體狀,,同石蠟混合時(shí),,可增加石蠟的硬度,由于松香質(zhì)脆,,混合后可增加硬度但韌性不足,。
當(dāng)然使用質(zhì)量好的石蠟,,也是重要的,不能為了省錢,,而購置雜質(zhì)很多的石蠟,,切出的片子也好不到哪去。因含雜質(zhì)太多不光影響石蠟對組織的浸透,,而且在切片時(shí),,還可因石蠟的雜質(zhì)過多,含有大的顆粒,,而使片子出現(xiàn)劃痕,。
Leica提供多種石蠟供選擇,其中39601006(Paraplast Regular石蠟,,常用型,,顆粒裝,8*1公斤/箱,,56℃,,脫水/包埋通用)和39601095(Paraplast High Melt石蠟,高熔點(diǎn)型,,顆粒裝,,8公斤裝,56-58℃,,脫水/包埋通用)廣州東銳常備庫存,。
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