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TA1535   (Ames試驗(yàn)）

遺傳毒性試驗(yàn)在食品、藥物,、化妝品,、環(huán)境等各領(lǐng)域安全檢測(cè)及評(píng)價(jià)上得到了廣泛應(yīng)用。其中比較常見(jiàn)的是Ames試驗(yàn),，也是經(jīng)典的測(cè)試化學(xué)物或藥物致突變實(shí)驗(yàn),，該法測(cè)定主要在培養(yǎng)皿中進(jìn)行，具有簡(jiǎn)單,、快速,、精確而又靈敏的特點(diǎn)，被世界各國(guó)廣泛采用,。為了使以上試驗(yàn)條件更接近于哺乳動(dòng)物的代謝情況,，在測(cè)試系統(tǒng)中加入哺乳動(dòng)物微粒體酶（S9)，可彌補(bǔ)體外試驗(yàn)缺乏代謝活化系統(tǒng)之不足,。

齊氏生物提供的沙門(mén) 氏菌株（TA97a,、TA98、TA100,、TA102,、TA1535）TA1535   (Ames試驗(yàn)）和 WP2uvrA大腸桿菌  (Ames試驗(yàn)）, 經(jīng)過(guò)鑒定，菌株特性與活菌數(shù)量符合Ames試驗(yàn)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),，并以甘油菌的形式提供,，融化后可直接使用。 為了保證試驗(yàn)效果,，建議搭配齊氏生物研發(fā)的S9代謝活化系統(tǒng)一起使用,。



保存條件：干冰運(yùn)輸,，-80℃保存,。
注意事項(xiàng)：
在使用過(guò)程中要特別注意避免培養(yǎng)基污染菌株,。
本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療,，不得用于食品或藥品,，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的健康和安全,，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴好一次性手套進(jìn)行無(wú)菌操作,。

延伸閱讀

Ames試驗(yàn)的常規(guī)方法有斑點(diǎn)試驗(yàn)和平板摻入試驗(yàn)

1．菌株鑒定 用于測(cè)試的菌株，需經(jīng)基因型和生物學(xué)性狀鑒定,，符合要求才能投入使用,。

目前推薦使用的一套菌株是TA97、TA98,、TA100和TA102,。鑒定前先進(jìn)行增菌培養(yǎng)。為鑒定結(jié)果可靠,，需同時(shí)培養(yǎng)野生型TV菌株,，作為測(cè)試菌基因型之對(duì)照。增菌培養(yǎng)用牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基,，接種后于37℃,，100r/min振蕩培養(yǎng)12h左右，細(xì)菌生長(zhǎng)相為對(duì)數(shù)期末,，含菌數(shù)應(yīng)為1×109個(gè)/ml～2×109個(gè)/ml,。

鑒定項(xiàng)目：

（1）脂多糖屏障丟失（rfa）用接種環(huán)或一端撓起的接種針以無(wú)菌操作術(shù)取各菌株的增菌培養(yǎng)液，在營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上分別劃平行線,，然后用滅菌尖頭鑷夾取滅菌濾紙條,，浸濕結(jié)晶紫溶液，貼放在平板上與各接種平行線垂直相交,。蓋好皿蓋后倒置于37t溫箱,，培養(yǎng)24h后觀察結(jié)果。

（2）R因子 劃線接種,，貼放濾紙條及培養(yǎng)等均同上,，唯濾紙條浸濕的藥液不同，為氨芐青霉素鈉溶液,。TA102除pKM101外,，還有pAQ1，載有抗四環(huán)素的基因,，故另用濾紙條浸濕四環(huán)素溶液后貼放于劃線接種的平板上,。

（3）紫外線損傷修復(fù)缺陷（△uvrB）在營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上按上述方法劃線接種后,，一半接種線用黑玻璃遮蓋，另一半暴露于紫外光下8sec,，然后蓋好皿蓋并用黑紙包裹平皿,，防止可見(jiàn)光修復(fù)作用。培養(yǎng)同上,。

（4）自發(fā)回變 預(yù)先制備底平板,；向滅菌并在水浴內(nèi)保溫45℃的上層軟瓊脂中注入0.1ml菌液；混勻后傾于底平板上并鋪平,。平皿倒置于37℃溫箱培養(yǎng)48h,。

（5）回變特性——診斷性試驗(yàn) 上層軟瓊脂中除菌液外，還注入已知陽(yáng)性物之溶液,，需活化系統(tǒng)者并加入S9mix,，余同上。

組氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型由自發(fā)回變即可知,。

2．斑點(diǎn)試驗(yàn) 吸取測(cè)試菌增菌培養(yǎng)后的菌液0.1ml,，注入融化并保溫45℃左右的上層軟瓊脂中，需S9活化的再加0.3ml－0.4mlS9mix,，立即混勻,，傾于底平板上，鋪平冷凝,。用滅菌尖頭鑷夾滅菌圓濾紙片邊緣,，紙片浸濕受試物溶液，或直接取固態(tài)受試物,，貼放于上層培養(yǎng)基的表面,。同時(shí)做溶劑對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照，分別貼放于平板上相應(yīng)位置,。平皿倒置于37℃溫箱培養(yǎng)48h,。在紙片外圍長(zhǎng)出密集菌落圈，為陽(yáng)性,；菌落散布,，密度與自發(fā)回變相似，為陰性,。

3．平板摻入試驗(yàn) 將一定量樣液和0.1ml測(cè)試菌液均加入上層軟瓊脂中,，需代謝活化的再加0.3ml－0.4ml S9mix，混勻后迅速傾于底平板上鋪平冷凝,。同時(shí)做陰性和陽(yáng)性對(duì)照,，每種處理做3個(gè)平行。試樣通常設(shè)4個(gè)～5個(gè)劑量,。選擇劑量范圍開(kāi)始應(yīng)大些,，有陽(yáng)性或可疑陽(yáng)性結(jié)果時(shí),，再在較窄的劑量范圍內(nèi)確定劑量反應(yīng)關(guān)系。培養(yǎng)同上,。同一劑量各皿回變菌落均數(shù)與各陰性對(duì)照皿自發(fā)回變菌落均數(shù)之比,，為致變比（MR）。MR值≥2,，且有劑量-反應(yīng)關(guān)系,，背景正常,，則判為致突變陽(yáng)性,。