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明膠包被24孔培養(yǎng)板(細胞培養(yǎng)耗材)
為了適應(yīng)不同實驗需要,,需要對培養(yǎng)器皿(培養(yǎng)瓶/培養(yǎng)板)用不同的物質(zhì)包被后使用,既可以促進細胞貼壁,也可以滿足一些特殊檢測需要,。
針對細胞培養(yǎng)中的不同包被需求,,齊氏生物特推出以下4大包被系列:
(1)I 型膠原包被
(2)多聚賴氨酸(Poly-Lysine)包被
(3)明膠包被
明膠包被24孔培養(yǎng)板(細胞培養(yǎng)耗材)
細胞的貼壁和生長,用于培養(yǎng)正?;蜣D(zhuǎn)染細胞,,如血管內(nèi)皮細胞、心肌細胞,、胚胎干細胞,、胰島 細胞等。
該包被耗材具有以下特點:
① 促進多種細胞的貼壁,;
② 預(yù)包被的明膠層節(jié)省實驗準備的時間和費用,;
③ 批次間的穩(wěn)定性保證實驗結(jié)果的可重復(fù)性。
(4)基質(zhì)膠包被
基質(zhì)膠是從富含胞外基質(zhì)蛋白的EHS小鼠腫瘤中提取出基底膜基質(zhì),, 其主要成分有層粘連蛋白,、Ⅳ型膠原、巢蛋白,、硫酸肝素糖蛋白,,還包含生長因子和基質(zhì)金屬蛋白酶等。
基質(zhì)膠用于制備各種要求的基底膜基質(zhì),,用于細胞信號研究,,諸如:鼠腎干細胞形成腎小管過程中生長因子作用研究,鼠乳腺上皮干細胞的基因表達研究,,其中基質(zhì)膠包被24孔板(細胞培養(yǎng)耗材)用于transwell的腫瘤侵襲力實驗等,。
質(zhì)量檢測
每批均經(jīng)過細胞活力和培養(yǎng)性能測試,批次間良好的穩(wěn)定性,。
儲存使用
4℃保存,,穩(wěn)定保存6個月。
延伸閱讀
原代細胞產(chǎn)率和活力的思考
要獲得最大產(chǎn)量的活細胞,,選擇最合適的酶和正確的濃度包括酶與組織合適的孵化時間都是至關(guān)重要的,。圖4說明了細胞活力和產(chǎn)量與解離酶和反應(yīng)時間的關(guān)系。酶與組織接觸反應(yīng)過度或不足都會導(dǎo)致細胞活力低下,。下文概述了一些優(yōu)次細胞分離的解釋以及獲得*結(jié)果的解決方案,。
低產(chǎn)率和低活力 組織極有可能因為分離的太過激烈而導(dǎo)致細胞損傷。解決方案:改變酶的類型或者降低酶的濃度(例如:胰蛋白酶改為膠原酶,、膠原酶1改為膠原酶2)。
低產(chǎn)率和高活力 用于分離組織的酶過于溫和或者反應(yīng)時間太短,。解決方案:增加酶的濃度或者培養(yǎng)時間從而跟蹤監(jiān)測細胞產(chǎn)率和活力,。如果產(chǎn)量仍然保持低下,就要評估一種更強的消化酶或者加入第二種酶,。
高產(chǎn)率和低活力 分離該組織的酶可能是適合的,,但是這種酶組分的消化能力太強或者酶的濃度太高導(dǎo)致細胞損傷,。解決方案:降低酶的濃度或者酶與組織的反應(yīng)時間并監(jiān)測細胞產(chǎn)率和活性。另外,,通過加入牛血清蛋白(0.1 - 0.5% w/v BSA)或大豆胰蛋白酶抑制劑(0.01 - 0.1% w/v)與酶混合使它發(fā)生水解作用,。
高產(chǎn)率和高活力 所選擇的條件對于目標組織細胞分離是*方案。
除了上述所提到的分離方法外,,搗碎法對于原代細胞分離也是很重要的,。當組織與分離酶中反應(yīng)一定時間后,這種反復(fù)吹打的操作能夠?qū)⒔M織混合物打成碎片,。如果用力過猛,,細胞就會破壞從而活性降低;如果用力太輕,,組織碎片保持完好無損從而使原代細胞產(chǎn)率很低,。有效地搗碎組織的正確方法是用10mL的移液管以每3mL/秒的速度吹打。對于特定的組織,,只有在實驗中經(jīng)過反復(fù)嘗試和改進才能確定合適的搗碎速度和最佳分離方法,,但需注意在吹打中盡量避免細胞懸液中產(chǎn)生氣泡。
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