藥物代謝研究貫穿整個(gè)新藥研發(fā)周期,，從發(fā)現(xiàn)階段,、臨床前開發(fā)到臨床開發(fā)和上市后均需進(jìn)行相應(yīng)代謝研究,。藥物代謝研究一般分為體內(nèi)代謝研究和體外代謝研究,。與體內(nèi)代謝研究相比，體外代謝研究課直接觀察候選化合物與受試靶點(diǎn)的選擇性作用,，不需要消耗大量的樣品和實(shí)驗(yàn)動物,，操作快速便捷，適用于代謝信息不明確的候選化合物進(jìn)行高通量篩選,。

目前,，體外代謝研究已被廣泛應(yīng)用于新藥早期的代謝評價(jià)中，主要涉及代謝穩(wěn)定性,、代謝酶亞型研究以及代謝相互作用等,，肝微粒體是其中最重要的研究工具。肝微粒體由人或動物組織通過勻漿和離心制備,，富含CYP450酶,，其對肝微粒體酶活性貢獻(xiàn)主要力量?？紤]到種屬之間的外推,，了解細(xì)胞色素P450酶亞家族酶活的相似性和/或差異是較為重要的，以便選擇合適的種屬用于體外和體內(nèi)研究,。

迄今為止,，已有許多研究比較各種屬CYP450酶活性之間的差異，但多數(shù)為2-3種種屬或者1-2種探針底物。Bogaards等人在同一個(gè)研究體系中研究了7個(gè)種屬中9種CYP450酶活性的種屬差異^[1],這些亞型酶種類與FDA和CDE在有關(guān)體外藥物相互作用指導(dǎo)原則中所推薦研究的CYP450酶類別基本一致^[2][3],。本文簡單介紹Bogaards等人的研究成果,，以供參考。Boddards等人研究了小鼠,、大鼠,、兔、狗,、小型豬,、猴和人微粒體中CYP1A2、CYP2A6,、CYP2B6,、CYP2C9、CYP2C19,、CYP2D6,、CYP2E1、CYP3A,、CYP4A的活性,，檢測這些酶的活性依次所用探針底物為乙氧基試鹵靈（7-Ethoxyresorufin）、 （Coumarin）,、7-乙氧基-4-(三氟甲基)     7-Ethoxy-4-trifluoromethycoumarin）,、雙氯芬酸（Diclofenac）、美芬妥因(S-mephenytoin),、丁呋洛爾（Bufuralol）,、氯唑沙宗(Chlorzoxazone) 睪酮(Testosterone)、月桂酸(Lauric acid),。檢測結(jié)果見表1-表2,。

表1 CYP1A2、CYP2A6,、CYP2B6,、CYP2C9、CYP2C19酶活檢測結(jié)果

表2 CYP2D6,、CYP2E1,、CYP3A、CYP4A酶活檢測結(jié)果

對結(jié)果進(jìn)行分析,，酶活與人較為相似的物種見表3,。

表3 CYP酶活與人較為相似的物種

肝微粒體是體外研究一個(gè)化合物的代謝(酶抑制，清除率和代謝鑒定)以及藥物-藥物相互作用的主要工具,。齊氏生物提供的肝細(xì)胞微粒體,，每批產(chǎn)品都經(jīng)過嚴(yán)格的制備,、檢測，確保批次間穩(wěn)定性,，然后于凍存管包裝,，10 mg/管,；-80℃保存,，干冰運(yùn)輸。

參考文獻(xiàn)

[1] Bogaards JJ, Bertrand M, Jackson P, et al., Determining the best animal model for human cytochrome P450 activities: a comparison of mouse, rat, rabbit, dog, micropig, monkey and man. Xenobiotica. 2000; 30:1131-52.

[2] FDA. Guidance for Industry: In Vitro Drug Interaction Studies - Cytochrome P450 Enzyme- and Transporter-mediated Drug Interactions, 2020.

[3] CDE. 藥物相互作用研究指導(dǎo)原則(試行), 2021,。