紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)是化學(xué)、生物,、醫(yī)藥等領(lǐng)域常用的分析儀器,,其工作原理基于物質(zhì)對(duì)紫外-可見(jiàn)光的吸收特性。
光學(xué)原理基礎(chǔ)
當(dāng)一束平行單色光垂直照射到均勻,、非散射的吸光物質(zhì)溶液時(shí),,物質(zhì)分子中的電子會(huì)吸收特定波長(zhǎng)的光能,從低能級(jí)躍遷到高能級(jí),,導(dǎo)致透射光強(qiáng)度減弱,。吸光度(A)與入射光強(qiáng)度(I?)和透射光強(qiáng)度(I)的關(guān)系為A=-lg(I/I?),同時(shí)遵循朗伯-比爾定律,,即A=κcb,,其中κ為摩爾吸收系數(shù),c為溶液濃度,b為溶液的光徑長(zhǎng)度,。
儀器結(jié)構(gòu)與功能
紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)主要由光源,、單色器、吸收池,、檢測(cè)器和信號(hào)處理器等部分組成,。光源提供紫外和可見(jiàn)光區(qū)的連續(xù)光譜,如氘燈用于紫外區(qū),,鎢燈用于可見(jiàn)光區(qū),。單色器將光源發(fā)出的復(fù)合光分解為單色光,常用的有棱鏡和光柵,。吸收池用于盛放待測(cè)溶液,,一般有玻璃和石英兩種材質(zhì),石英吸收池適用于紫外和可見(jiàn)光區(qū),,玻璃吸收池僅用于可見(jiàn)光區(qū),。檢測(cè)器將透過(guò)吸收池的光信號(hào)轉(zhuǎn)換為電信號(hào),常見(jiàn)的有光電管和光電倍增管,。信號(hào)處理器對(duì)檢測(cè)器輸出的電信號(hào)進(jìn)行放大,、處理和顯示。
實(shí)際應(yīng)用意義
通過(guò)測(cè)量物質(zhì)在特定波長(zhǎng)下的吸光度,,可對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析,。例如,在藥物分析中,,可用于測(cè)定藥物的含量和純度,;在環(huán)境監(jiān)測(cè)中,可檢測(cè)水體和大氣中的污染物,。紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)憑借其高靈敏度,、高選擇性和廣泛的適用性,為科學(xué)研究和工業(yè)生產(chǎn)提供了重要的分析手段,。
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