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武漢原生原代生物醫(yī)藥科技有限公司資料大小
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277次一,、形態(tài)學(xué)鑒定
1. 在倒置顯微鏡中直接觀察活細胞的形態(tài)學(xué)特征
2. 細胞染色檢查 :
a) 將無菌玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,加細胞懸液后培養(yǎng),;
b) 待細胞長滿玻片后取出,,用 PBS 清洗,之后放于載玻片上,,待其自然干燥,;
c) 用 PBS/甲醇(1:1)固定 15 分鐘;
d) 棄固定液,,加合適的染色液染色,;
e) 染色完畢后用清水洗凈,置于空氣中干燥,,
f) 干燥后,,用二甲苯透明,光學(xué)樹脂封片后觀察,。
二,、免疫組織細胞化學(xué)鑒定
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬
片,;
2. PBS 清洗標本 3 次,,各 1 分鐘;
3. 4%多聚甲醛固定 15 分鐘,;
4. 置于空氣中干燥,;
5. PBS 清洗標本 3 次,各 2 分鐘,;
6. 0.5%Triton X-100 孵育 1 次 20 分鐘,;
7. PBS 清洗標本 3 次 各 2 分鐘;
8. 3%H2O2孵育 15 分鐘,;
9. DPBS 清洗標本 3 次 各 2 分鐘,;
10. 封閉血清孵育(5%正常二抗血清 DPBS 液 20 分鐘)
11. 一抗孵育,,4℃ 過夜或 37℃ 60 分鐘;
12. PBS 清洗標本 3 次 各 5 分鐘,;
13. 二抗工作液孵育(濕盒)37℃ 30 分鐘;
14. PBS 清洗標本 3 次 各 5 分鐘,;
15. C 液(濕盒) 37℃ 30 分鐘,;
16. PBS 清洗標本 3 次,各 5 分鐘,;
17. 用顯色液進行顯色,;
18. 蒸餾水洗滌 2 次 1 分鐘;
19. 蘇木素復(fù)染 1 分鐘,;
20. 清水洗滌 30 分鐘,;
21. 光學(xué)樹脂封片后觀察。
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